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琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

乳酸脱氢酶存在于一切有糖酵解作用的细胞中, 在NAD+存在下催化乳酸脱氢形成丙酮酸或使丙酮酸还原成乳酸。本实验目的是掌握用琼脂糖凝胶电泳分离LDH 的原理和方法,学习定量测定动物血清中LDH 的各同工酶的相对百分含量。

来源:丁香实验

操作方法

电泳分离法

1 . 凝胶板的制作: 将电泳洗净、干燥, 两边用胶带封口,选好梳子并装好, 调节水平, 浇已熔化好的0 . 7%琼脂糖凝胶适量, 冷至凝固, 然后移至4 ℃冰箱中放置30~50 min 后使用。 2 . 点样及电泳: 将电泳缓冲液加到槽中刚好盖上凝胶, 用微量取样器加20 μl 血清样品(样品中或加入溴酚蓝指示剂) , 按4~5 mA/ cm 胶宽调节电流, 电泳大约40~50 mi

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