LacZ 和 trpE 融合蛋白的表达及纯化实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

融合蛋白一般都作为抗原使用以刺激抗体的产生，许多情況下也可用于生化分析。目前两种广泛应用的大肠杆菌表达系统是利用pUR载体系列的lacZ融合系统及利用pATH载体系列的trpE融合系统。

来源：丁香实验

操作方法

基本方法

利用pUR载体表达lacZ融合蛋白： 1a. 按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中，转化大肠杆菌感受态细胞，在LB/氨苄青霉素平皿上挑选转化子。 2a. 接种含表达载体的单菌落于2~5 ml LB/氨苄青霉素培养基中，37℃振荡培养过夜。 3a. 取1 ml 过夜培养物加入盛于2 L 瓶中的400 ml LB/氨苄青霉素培养基中，37℃振荡培养直至OD600达到0.