硝酸纤维素滤膜结合实验确定 RNA- 蛋白质解离常数实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合，该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合，如果蛋白质和核酸结合，那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合，但是这种结合必须能够承受过滤压力，并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合。在本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

一、材料与设备所有缓冲液必须用去除离子、有机物和生物污染的去离子水配制，但是核酸酶污染还是一个常见的问题，每个溶液必须采用硝酸纤维素滤膜过滤除去核酸酶，溶液储存在灭菌瓶中。使用移液管或塑料吸头转移液体，使用高纯度的试剂以避免核酸解的污染，否则可能造成解离常数的改变。 1. 点杂交所用装置如下： (1) 4 英寸 X 5 英寸的 Schleicher 和 Schuell （Keene 公司，