PAT 法分析 mRNA Poly（A）尾长度实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

PAT法 [ PCR poly(A) test ] 可以快速、灵敏地从总 RNA 中分析特异 mRNA，而且可以定量估算 RNA poly(A) 尾长度。这方法中，包括 cDNA 合成的整个操作过程都在一个反应管中完成，不仅操作更简便，也减少了可能存在的 RNase 污染。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

方案 5.10 PAT 法分析mRNA Poly（A）尾长度

一、材料与设备 1. PAT cDNA 制备 (1) DEPC 处理蒸馏水。 (2) 高浓度T4 DNA 连接酶（10 Weiss U/L）。 (3) 无 RNase H Superscript Ⅱ 反转录酶（RT) ( Life Technologies，Gairhersburg，MD，USA ) ( 200 U/μl )。 (4) 5 X Superscript Ⅱ RT 缓冲液。