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        PAT 法分析 mRNA Poly(A)尾长度实验

        实验分类:

        RNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        PAT法 [ PCR poly(A) test ] 可以快速、灵敏地从总 RNA 中分析特异 mRNA,而且可以定量估算 RNA poly(A) 尾长度。这方法中,包括 cDNA 合成的整个操作过程都在一个反应管中完成,不仅操作更简便,也减少了可能存在的 RNase 污染。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。

        来源:丁香实验

        操作方法

        方案 5.10 PAT 法分析mRNA Poly(A)尾长度

        一、材料与设备 1. PAT cDNA 制备 (1) DEPC 处理蒸馏水。 (2) 高浓度T4 DNA 连接酶(10 Weiss U/L)。 (3) 无 RNase H Superscript Ⅱ 反转录酶(RT) ( Life Technologies,Gairhersburg,MD,USA ) ( 200 U/μl )。 (4) 5 X Superscript Ⅱ RT 缓冲液。

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