Fe（II）-EDTA 保护测定法实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

Fe（II）-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂，是 RNase 保护分析的一个补充方法，其优点是很少或没有碱基序列的特异性，其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的，它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

方案5.9 Fe（II）-EDTA保护测定法

一、材料与设备 1. 水浴。 2. 垂直电泳装置。 3. 暗片盒。 4. RNA 洗脱缓冲液：80% 甲酰胺，40 mmol/L PIPES，1 mmol/L EDTA，0.4 mol/L NaCL。 5. 退火缓冲液：50 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.5 )，50 mmol/L NaCl，10 mmol/L MgCl2。 6. (NH4)2Fe(SO4)2 溶液：1