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哺乳动物细胞总 RNA 快速分离

实验分类:

RNA 实验

最新修订时间:

简介

利用 SDS 裂解细胞 ,并用酸性苯酚分级提取细胞总 RNA, 这是一种适合于处理 mRNA 含量相对较低、内源性 RNase 活性较髙的细胞的方法,该方法 RNA 损失极少,简便易行 ,可同时处理多个样品。对大多数细胞株来说,在一个直径 90mm 培养皿中培养细胞 ,其 RNA 收率为 100〜200ug。

来源:丁香实验

操作方法

哺乳动物细胞总RNA快速分离

一 材料与设备 1)尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 (PBS) 2)10 mmol/L EDTA (pH8.0 ) 3)0.5% SDS 4)0. l mol/L 乙酸钠(pH 5.2 ) 5)水平衡的苯酚 6)乙醇 7)l mol/L Tris-Cl (pH8.0 ) 8)5 mol/L NaCL 二 操作方法 1 ) 吸出培养液,用 7m l 冰预冷的无钙镁离子磷酸缓冲盐

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