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        差异表达 cDNA 的重新扩增、克隆与测序实验

        实验分类:

        PCR 技术

        最新修订时间:

        简介

        从丙烯酰胺凝胶上切下潜在的差异表达 cDNA 之后,用同一种锚定-任意引物组合重新扩增 cDNA, 反应条件与最初 PCR 相同。重新扩增的产物,可以进行克隆和测序,以供进一步分析。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

        来源:丁香实验

        操作方法

        差异表达 cDNA 的重新扩增、克隆与测序实验

        一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 1.5% 琼脂糖凝胶,加溴化乙锭 (见第 9 步) 蒸馏水 DNA 点样染料 30% 甘油 70% 蒸馏水 0.003% 溴酚蓝 0.003% 二甲苯腈 FF(GenHunterS403) 溴化乙锭溶液(0.5ug/ml) 蒸馏水 重新扩增混合液(见第 7 步) 2. 核酸和寡核苷酸 任意引物(H-AP)(2 mmol/L) cDNA

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