消减 cDNA 或基因组 DNA 文库的制备实验

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

一次双向消减，需要总量为 2ug 的基因组 DNA 或 cDNA。大多数分离 RNA 和基因组DNA 的方法都适用于本实验（Sambrooketal.1989;ChomczynskiandSacchi1987;Farrell1993)。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

消减 cDNA 或基因组 DNA 文库的制备实验

第1阶段：RNA和DNA的分离一次双向消减，需要总量为2ug的基因组DNA或cDNA。大多数分离RNA和基因组DNA的方法都适用于本实验（Sambrooketal.1989；Chomczynskiand Sacchi 1987；Farrell1993)。如果可能，尽可能使用同样的试剂和方案纯化待比较的样品。如果是基因组DNA作为初始材料，下一步为RsaⅠ 消化（本方案的第3阶段）；如果是RNA