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        基于脾坏死病毒的载体

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        这一章描述的实验方法是基于我们关于来自S N V 及其紧密相连的R E V -A 载体的实 验 (P a r v e
        e n e t a L 2000)。我们曾用这两种病毒载体对各种细胞进行基因转移,包括初期的造血细胞、人脑及有丝分裂后的神经元细胞(Parveen etal.2000)。与其他反转录病毒载体相同,基 于 S N V 载体系统的三个主要元件是:①包装信号序列(恥 ,以确保载体R N A 壳体化进入反转录微粒;②反转录机制;③整合前病毒载体进人宿主细胞的必需序列(Kurian etal.2000; D o r n b u r g 2003)。为了加强病毒微粒的治疗潜能,病毒的生命周期被遗传改造,即这些微粒在转染时只能转移一个治疗性基因而不能进一步复制。
        作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」

        来源:丁香实验

        操作方法

        基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用 材料

        基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用 材料 试剂 氯 化 钙(CaCl2) (2mol/L) 溶 解 14. 7 g CaCl2 于 IOOml H2O 中。过滤除菌或高压灭菌。 转染的细胞系: 293T 和 D17 (ATCC) 甘 油(1 0 % 〜2 0 % ) (合适的) H an

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