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        差异显示技术(DD)实验

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        D D LiangPardee在 1992年首次提出。至今有大约1700篇 与 DD相关的文章发表,可见其影响巨大。许多与神经变性和凋亡相关的基因也通过DD 的方法得以鉴定。 .
        DD的原理基于对cDNA分子进行随机扩增和随后按大小进行的分离。为此,首先需分离靶细胞或组织中总RNA,反转录为cDNA
        现代神经科学研究技术
        作者:U.Windhorst & H. Johansson  翻译:赵志奇 陈军

        来源:丁香实验

        操作方法

        差异显示实验

        一、.RNA 的分离 1.一般原则 差异显示技术成功最关键的因素就是RNA 的质量。为了最大限度减少RNA的降解应做到: —戴手套 一使用无菌器具。所有塑料器皿需在180℃ 过夜 —使用无RNA酶的玻璃器皿。所有的玻璃器皿都须在180L过夜一所有的缓冲液都必须去除RNA酶。因此,应使用DEPC处理过的重蒸水(将2.5 ml的DEPC力口入到2.5L的重蒸水中后高压)

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