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        脉冲场凝胶电泳制备 DNA(酵母完整 DNA 的分离)

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        制备用于电泳的酵母 DNA,先用酶破坏酵母细胞胞壁,然后在熔化的低熔点琼脂糖中混悬,制成栓。将栓浸入含蛋白酶的裂解缓冲液,以加速细胞裂解和除去蛋白质。此方法在 Schwartz 和 Cantor (1984) 最初介绍的方法上略有改进,它可用于制备作为 高分子质量标准的酵母染色体和酵母人工染色体(YAC)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        脉冲场凝胶电泳制备DNA(酵母完整DNA的分离)

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 细胞清洗缓冲液(0.01 mol/L Tris-Cl ( pH 7.6),0.05 mol/L EDTA ( pH 8.0),室温存放。) EDTA ( 0.05 mol/L, pH 8.0) L 缓冲液(0.1 mol/L EDTA ( pH 8.0),0.01 mol/L Tris-Cl ( pH 7.6),0.02 mol/L NaCl,4℃ 存放)

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