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        CPB 沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        本方案介绍用阳离子去污剂——十六烧基溴化吡啶(cetylpyridinium bromide,CPB) 定量差异沉淀分离放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物。此方法最初是用于回收磷酸缓冲液从羟磷灰石柱洗脱的 DNA(Geek and Nasz 1983), 也可用于沉淀放射性标记核酸包括寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。

        来源:丁香实验

        操作方法

        CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

        材料 溶液和缓冲液 稀释贮存液至适当浓度。 十六烷基溴化吡啶(CPB)1%,m/V) 将 1 gCPBW(sigma 公司)溶于 100 ml 水中,加热并用磁力搅拌器搅拌溶液可加速溶解。待去污剂全部溶解后,将溶液冷却至室溫,用硝酸纤维素滤膜过滤(0.45um 孔径) EDTA-Tris(0.5mol/L,pH6.0) 用 60 ml 水溶解 0.1mol EDTA, 在搅拌溶液的同时, 加

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