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        利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        下面讲述的 Polybrene 与 DMSO 转染的方法是 Aubin 等(1997) 方法的改进。利用此方法可以有效地将质粒 DNA 转染中国仓鼠卵巢细胞与角化细胞,产生的转化体比磷酸钙-DNA 沉淀物方法的多 15 倍。但是使用高分子量 DNA 时两种方法的转染效率无明显差别。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

        来源:丁香实验

        操作方法

        利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验

        材料 缓冲液与溶液 贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。 稀释贮存液至所需浓度。 DMSO(30%)/含血清培养基 第 3 步使用 DMSO 前,将高效液相(HPLC) 纯或组织培养纯的 DMSO 加入含血清的细胞生长培养基中至终浓度 30%(V/V)。 Giemsa 染液(10%m/V) 使用前用磷酸缓冲盐或水配制,用 Whatman1 号滤纸过滤。 甲醇 Polybrene(10

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