用于基因组文库中的真核 DNA 的部分酶切（预反应）实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

不管高分子质量 DNA 的碱基组成与序列如何，通过水压机械剪切（hydrodynamic shearing) 均可将其以半随机形式片段化。但是，用这种方法制备的 DNA 需进行一系列酶反应操作（末端修复、甲基化、接头连接、接头消化）以保护内部限制位点，以及产生一些黏性末端。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

用于基因组文库中的真核DNA的部分酶切（预反应）实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液蔗糖凝胶上样缓冲液 Tris-Cl (10 mmol/L, pH 8.0) 2. 酶和缓冲液限制性内切核酸酶 3. 凝胶琼脂糖凝胶（0.6%)，用 0.5X TBE，含 0.5 μg/ml 溴化乙锭琼脂糖凝胶，用于脉冲场凝胶电泳 4. 核酸和寡核苷酸基因组 DNA，高分子质量 λ 噬菌体 DNA 和质粒寡聚体 5. 专用设备毛细管，