重叠延伸产生特异位点诱变实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

重叠延伸法进行特异位点诱变需要四种引物（请见图 13-4)(Higuchi et al.1988, Hetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

重叠延伸产生特异位点诱变实验

材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液的成分及所需试剂请见附录 1。将贮存液稀释释到适当的浓度。 10x 扩增缓冲液含有四种 dNTP 的混合溶液，每种 dNTP 浓度为 20 mmol/L。酶和缓冲液热稳定 DNA 聚合酶为了避免碱基的错误掺入，在重叠延伸诱变反应中应使用带 3'—5'外切核酸酶校对能力的髙效热稳定 DNA 聚合酶。另外. 使用的 DNA 聚合酶一定不能具有