含尿嘧啶的单链噬菌体 M13 DNA 制备实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

经典的 Kunfcel 寡核苷酸指导的诱变方法利用大肠杆菌中的尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (glycosylase) 特异地筛除去含尿嘧啶碱基的 DNA 的选择性作用（请参考寡核苷酸诱变信息栏）。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

含尿嘧啶的单链噬菌体 M13 DNA 制备实验

材料缓冲液和溶液各种贮存液，缓冲液和试剂成分请参阅附录 1。将贮存液稀释至所需的浓度。乙醇氯化钠（2.5mol/L) 含 15% 聚乙二醇（m/V，PEG8000) 苯酚（pH8.0) 苯酚：氯仿（1:1,V/V) 醋酸钠（3mol/L,pH5.2) TE(pH7.6) 凝胶琼脂糖凝胶请参阅步骤 16。核酸和寡核苷酸 DNA 分子质量标准，原始的重组 M13