• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        收藏
        wx-share
        分享

        制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法实验(制备超级感受态细胞)

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        采用 Inoue 的方法(1990)制备大肠杆菌感受态细胞很好时甚至能达到 Hanahan 方法(1980)的转化效率。但在标准的实验室条件下,达到 1X108~3X108 个转化克隆/ μg 质粒 DNA 的转化效率更为常见。与 Hanahan 方法相比,这一方法的优点在于并不过分地讲究细节,但是重复性更好,而且更有预见性。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法实验(制备超级感受态细胞)

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 (1) 二甲亚砜 DMSO 二甲亚砜的氧化产物据推测为二甲硫醚,是转化的抑制物(Hanahan 1985)。为避免上述问题,应购买高质量的 DMSO。 (2) Inoue 转化缓冲液 用前置于冰上预冷至 0℃。 2. 核酸和寡核苷酸 质粒 DNA ( 重组质粒) 3. 培养基 (1) LB 或 SOB 培养基(培养最初的细菌生长物) (2) SOB

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序