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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
小鼠血清、血浆或细胞培养上清液
- 应用:
小鼠金属蛋白酶组织抑制剂1酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的TIMP-1的ELISA试剂盒。
- 检测方法:
双抗体夹心ELISA
- 检测范围:
最小检出量为22pg/ml
- 规格:
96次
碧云天的Mouse TIMP-1 ELISA Kit (Mouse Tissue Inhibitors of Metalloproteinases 1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠金属蛋白酶组织抑制剂1酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的TIMP-1的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为22pg/ml,与人TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4, 大鼠TIMP-1等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases, MMPs)是一种具有锌指结构的肽链内切酶,能够催化细胞外基质蛋白发生降解,从而调控发育、组织重构、伤口愈合和肿瘤转移等过程。MMPs以酶原形式分泌,酶原经过蛋白水解后变成有活性的MMPs。金属蛋白酶组织抑制剂(Tissue Inhibitors of Metalloproteinases, TIMP)通过与MMPs形成1:1的复合物抑制MMPs活性。TIMPs与MMPs以非共价键相连,能够阻止MMP与底物连接。TIMP-1属于诱导型蛋白而TIMP-2属于组成型蛋白,二者都属于游离蛋白且分布广泛;TIMP-3主要分布在细胞外基质,TIMP-4则只存在于心肌组织。
TIMP-1是一种氨基酸长度为184的糖基化蛋白,但糖基化并非维持其活性所必须。TIMP-1具有12个半胱氨酸残基,参与形成结构中的二硫键,分子N端具有与MMP底物结合位点相结合的基团,C端则能够与MMP外部结合,增强整体的亲和力。TIMP-1与无活性的pro-MMP-9具有很强的结合能力,在与pro-MMP-9形成复合物后,TIMP-1凭借N端的结合位点依旧保持着抑制其他活化MMP的能力。
许多细胞和组织都能够合成TIMP-1。TIMP-1基因的转录受到IL-1、IL-6、OSM、LIF和TNF-α等许多细胞因子和佛波酯的调控。TIMP-1的许多生理功能都与MMPs密切相关,MMP/TIMP-1浓度失衡会导致关节炎、肿瘤生长和转移等病理改变。另一方面,TIMP-1也具有一些独立的功能,例如TIMP-1能够抑制B细胞的凋亡,说明TIMP-1除了抑制MMPs外,还能够与一些特定细胞结合并进入细胞核内,促进特定细胞的存活和生长。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠TIMP-1的浓度,其原理见图1。小鼠TIMP-1特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的小鼠TIMP-1会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠TIMP-1抗体后,生物素化抗小鼠TIMP-1抗体与小鼠TIMP-1结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠TIMP-1浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中小鼠TIMP-1浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PT883-1 | 小鼠TIMP-1抗体预包被板 | 8孔×12条 |
| PT883-2 | 样品分析缓冲液 | 5ml |
| PT883-3 | 标准品稀释液 | 10ml |
| PT883-4 | 小鼠TIMP-1标准品 | 2-4瓶 |
| PT883-5 | 小鼠TIMP-1生物素化抗体 | 10ml |
| PT883-6 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 10ml |
| PT883-7 | 洗涤液(20X) | 30ml |
| PT883-8 | TMB溶液 | 10ml |
| PT883-9 | 终止液 | 5ml |
| PT883-10 | 封板膜(透明) | 2张 |
| PT883-11 | 封板膜(白色) | 2张 |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。
更多产品简介及说明书见碧云天官网:https://www.beyotime.com/index.htm
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文献和实验RAT/MOUSE GROWTH HORMONE ELISA KIT
实验原理 This assay is a Sandwich ELISA based, sequentially, on: 1) capture of rat or mouse Growth Hormone molecules from samples to the wells of a microtiter plate coated by a pre-titered amount of anti-Growth Hormone
Mouse Models of MMP and TIMP Function
-deficient and TIMP-null mice and strategies and pitfalls in targeted mutagenesis.
实验步骤 1. Using the AbC™ Anti-Mouse Bead Kit 1) Completely resuspend the AbC™ capture beads (Component A) and negative beads (Component B) by gently vortexing for 30 seconds before use. 2) Label
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