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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
人血清、血浆或细胞培养上清液
- 应用:
人白细胞介素33酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-33的ELISA试剂盒。
- 检测方法:
双抗体夹心ELISA法
- 检测范围:
28pg/ml
- 规格:
96次
碧云天的Human IL-33 ELISA Kit (Human Interleukin-33 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素33酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-33的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为28pg/ml,与人的pro-IL-33, IL-1α,IL-1β,IL-18及小鼠IL-33没有交叉反应性,板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素-33 (Interleukin-33, IL-33),是一种分子量为30kDa的促炎性蛋白。IL-33主要表达在平滑肌细胞和气道上皮细胞中,当细胞受到炎性刺激时,IL-33的表达会出现上调。小鼠IL-33首先编码合成具有266个氨基酸的前体分子,其N端具有细胞核定位信号区域和helix-turn-helix结构,C端在结构上与IL-1家族具有一定的相似性。全长IL-33能够与核染色质相互作用,并发挥转录阻遏蛋白的作用。利用Caspase-1样蛋白酶对全长IL-33分子进行酶切,会得到分子量为18kDa的分泌型成熟IL-33分子。成熟的人IL-33与小鼠和大鼠IL-33分别具有57%和59%的氨基酸同源性。
成熟的IL-33能够与跨膜受体ST2L/IL-1 R4结合,在IL-1 R3的协助下,完成IL-33依赖的NF-κB激活。对受体ST2L的选择性剪切会得到游离的诱骗受体ST2,ST2与IL-33的结合会封闭ST2L信号通路,抑制IL-33对免疫及心脏方面的作用效果。在哮喘和心力衰竭的患者中,ST2水平会显著升高。
分泌型IL-33分子能够促进Th2型免疫应答,导致嗜酸性粒细胞增多症和过敏反应。在Th2细胞中,IL-33能够上调IL-4、IL-5、IL-13以及ST2L的表达。在肥大细胞中,IL-33能够增强部分细胞因子和趋化因子的产生,但是并不会引发细胞脱粒。IL-33/ST2L系统对于心脏具有一定的积极作用,IL-33能够减轻由血管紧张素II或Phenylephrine造成的心肌细胞肥大,机械压力会诱导心脏成纤维细胞和心肌细胞各自产生IL-33和ST2。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-33的浓度,其原理见图1。人IL-33特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IL-33会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-33抗体后,生物素化抗人IL-33抗体与人IL-33结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-33浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中靶蛋白浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PI631-1 | 人IL-33抗体预包被板 | 8孔×12条 |
| PI631-2 | 样品分析缓冲液 | 5ml |
| PI631-3 | 标准品稀释液 | 10ml |
| PI631-4 | 人IL-33标准品 | 2-4瓶 |
| PI631-5 | 人IL-33生物素化抗体 | 10ml |
| PI631-6 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 10ml |
| PI631-7 | 洗涤液(20X) | 30ml |
| PI631-8 | TMB溶液 | 10ml |
| PI631-9 | 终止液 | 5ml |
| PI631-10 | 封板膜(透明) | 2张 |
| PI631-11 | 封板膜(白色) | 2张 |
| — | 说明书 | 1份 |
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。
更多产品简介及说明书见碧云天官网:https://www.beyotime.com/index.htm
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