Human IL-13 ELISA Kit

碧云天的Human IL-13 ELISA Kit (Human Interleukin-13 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白细胞介素13酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-13的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为247pg/ml，与人IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素13 (Interleukin-13, IL-13)是一种分子量在17kDa的免疫调节细胞因子，主要参与过敏、肿瘤和组织纤维化等病理过程。IL-13主要由Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞、自然杀伤细胞、肥大细胞、内脏平滑肌细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞产生。IL-13主要以单体形式存在，在两个内部二硫键的作用下形成4-α-螺旋结构。成熟的人IL-13与小鼠和大鼠IL-13大约具有58%的氨基酸同源性，尽管同源性较低，但在不同物种间，IL-13仍然存在一定程度的交叉反应性。IL-13能够抑制巨噬细胞、成纤维细胞和内皮细胞中促炎性细胞因子和其他细胞毒物质产生。IL-13还能作用于B细胞，刺激细胞活化，诱导免疫球蛋白向IgE型转化，并且上调CD23/FcεRII表达。在出现哮喘、气道高反应和组织纤维化时IL-13表达会升高。
IL-13和IL-4在一定程度上共用一个受体系统，因此二者在生物学效应上具有一定相关性。IL-13与低亲和力跨膜受体IL-13 Rα1结合，IL-13 Rα1能与跨膜受体IL-4 Rα形成信号传递复合物。这种高亲和力的受体复合物在功能上同时也能作为II型IL-4受体。另外，IL-13还能与高亲和力受体IL-13 Rα2结合，这种受体既能够表达于细胞表面也能够在以游离形式存在。IL-13 Rα2实际是IL-13的诱骗受体，主要阻止IL-13与IL-13 Rα1/IL-4 Rα复合物结合，从而阻止IL-13信号传递。同时IL-13 Rα2还能抑制IL-4信号应答。在Th2型免疫应答和炎性组织损伤时IL-13 Rα2表达会增加。除了上述功能外，IL-13 Rα2还能通过参与IL-13信号传递直接促进肿瘤细胞侵袭，促进组织纤维化恶化。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-13的浓度，其原理见图2。人IL-13特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IL-13会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-13抗体后，生物素化抗人IL-13抗体与人IL-13结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-13浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人IL-13浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PI543-1	人IL-13抗体预包被板	8孔×12条
PI543-2	样品分析缓冲液	5ml
PI543-3	标准品稀释液	10ml
PI543-4	人IL-13标准品	2-4瓶
PI543-5	人IL-13生物素化抗体	10ml
PI543-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PI543-7	洗涤液(20X)	30ml
PI543-8	TMB溶液	10ml
PI543-9	终止液	5ml
PI543-10	封板膜(透明)	2张
PI543-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。