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上海觅拓生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验Tris-HCl(pH8.0) 100mM 1M 10 ml EDTA 20 mM 0.5M 4 ml NaCl 1.4M 5M 28 ml 0.5M EDTA (pH8.0)
今天师兄从丁香园论坛里扒拉出来一些干货,对一些细菌、真菌 DNA 提取方法,做了总结,现在分享给大家: 细菌 DNA 的提取: 方法一:试剂: 1. 抽提缓冲液 2% CTAB (W/V)、2% PVP K25 (w/v)(去色素)、100 mM Tris-HCl (pH8.0)、25 mM EDTA (pH8.0)、2.0M NaCl 2.10M LiCl 3. 2M LiCl
,100mM KCl,0.5 mM EDTA,1 mMDTT,0.5℅吐温-20, 0.5℅NP-40,50℅甘油,PH8.0)重悬,酶液用缓冲液 B 4℃透析过夜。 5).步骤4所得到的酶液即可用于检测实验,为了得到更纯的酶,粗蛋白经中速滤纸过滤后过Q sepharose FF,收集穿透液,再利用工程菌表达的6His作为纯化标记。上清(补足NaCl至终浓度为0.5M)流过已螯合Ni的Ni-NTA柱,该柱先用10倍床体积结合缓冲液(20mM Tris-HCL,0.5MNaCl,PH8.0, 5mM
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