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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Pectin Lyase Test Kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/24样

果胶裂解酶(pectinate lyases,PL)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义果胶裂解酶(EC4.2.2.10)是果胶酶的重要组成部分,是一种能降解植物细胞壁,导致植物
组织软化甚至死亡的解聚酶,来源比较广泛,主要来源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清, 提高水果出汁率,植物病毒的纯化,纸浆的漂白和纺织品的生物精炼,在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。
测定原理
果胶裂解酶作用于果胶中的 α-1,4 糖苷键,生成在还原端 C4 和 C5 之间位置具有不饱和键的不饱和寡聚半乳糖醛酸,在 235nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
酶液提取
1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。10000g ,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议
500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 培养液:直接测定。
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酶活性计算公式
- 组织中 PL 活性
- 按照蛋白浓度计算
PL 活性(nmol/min/mg prot)= A÷(ε×d)×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T
= 64.1×A÷Cpr
- 按照样本质量计算
PL 活性(nmol/min/g 鲜重)= A÷(ε×d)×V 反总÷(V 样×W÷V 样总)÷T
= 64.1×A÷W
- 细胞 PL 活性
PL 活性(nmol/min/104cell)= A÷(ε×d)×V 反总÷(V 样×细胞数量÷V 样总)÷T
= 64.1×A÷细胞数量
- 培养液 PL 活性
PL 活性(nmol/min/mL)= A÷(ε×d)×V 反总÷V 样÷T
= 64.1×A
ε:不饱和半乳糖醛酸摩尔消光系数:5200L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应体系中样本体积,0.1mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr: 样本蛋白浓度,mg/mL;W,样本质量,g;T:反应时间,30min
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文献和实验问:我最近想测量果汁中果胶酶的活性,通过查资料发现比较常用的方法为PH-stat法,但该方法要用自动电位滴定仪,该仪器很贵,各位有没有更好的方法,或者谁有这个仪器,我现在和着急,恳请各位的 帮助,多谢!答:果胶酶包含的酶组分为:对果胶作用的解聚酶分为a:聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG),有内切、外切两种酶系(EC.3.2.1.41);b:聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(PMGL),分内切、外切两种酶系(EC.4.2.2.3),果胶酸解聚酶:a:聚半乳糖醛酸酶(PG),分内切(EC.3.2.1.15
藻酸 alginic acid 褐藻类细胞壁成分的多糖,在化学上是由D-甘露糖醛酸与L-古洛糖醛酸(L-guluronic acid)组成的一种聚糖醛酸。结合的方式是D-甘露糖醛酸为β-1,4-键,L-古洛糖醛酸为α-1,4-键,没有支链。然而因褐藻的种类不同两者的比例有所变化。它的生物合成机制仍不清楚,以藻酸为碳源生长的细菌(假单孢杆菌等)中有一种具有作用于藻酸的属于果胶裂解酶(eliminase)藻酸裂解酶(EC 4.2.2.3),此酶分解藻酸生成具有不饱和键的糖醛酸为非还原末端
碳水化合物活性酶主要存在于真菌中,包括白腐病、褐腐病和植物病原真菌。这些微生物降解植物细胞壁中含有木质素、半纤维素、纤维素、多糖和果胶的复杂基质。自1998年以来,CAZy数据库精心整理了五个碳水化合物活性酶家族的数据:糖苷水解酶(GH)、糖基转移酶(GT)、多糖裂解酶(PL)、碳水化合物酯酶(CE)和碳水化合物结合模块(CBM)。最近发现,一些成员的CBM和GH酶家族共同的作用模式,即裂解多糖单氧合酶(LPMO),已促使CAZy的馆长对数据库进行重大更新。在他们发表在《生物燃料的生物










