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- XK-SJH-A781
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Glycolate Oxidase Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
乙醇酸氧化酶（glycolate oxidase, GOX）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代谢中的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。
测定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸ben肼反应生成乙醛酸苯腙，在 324nm 有特征吸收峰。自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿。试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 35mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加 10mL 双蒸水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
酶液提取
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定操作表
| 测定管 | |
| 样本（μL） | 50 |
| 试剂一（μL） | 650 |
| 试剂二（μL） | 200 |
| 试剂三（μL） | 100 |
| 充分混匀，立即于 1mL 石英比色皿中测定 324nm 处 10s 和 190s 吸光值 A1 和A2，△A=A2- A1 |
|
相关图片：
酶活性计算公式
- 按照蛋白浓度计算
DA
- 按照样本质量计算
DA
ε：乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数：17L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积，1mL；V 样：反应中样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，3min
注意事项
- 测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样品用提取液进行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
- 色素含量较高的样品，可在提取酶时加活性炭吸附。
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
实验42 乙醇酸氧化酶活性测定（比色法） 原理 乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中起重要的作用，在它的作用下将乙醇酸氧化生成乙醛酸和过氧化氢，反应如下： 如果我们以二氯靛酚作为氢受体，接受乙醇酸氧化时脱下的H ，使二氯靛酚还原，此时原来为蓝色的染料则褪至无色，其反应如下： 利用染料颜色的变化，即可对酶的活性进行比色
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