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- P6764
- 2025年07月03日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
三个月
- 英文名：
Plasmid vector
- 库存：
10
- 供应商：
上海雅吉
- 规格：
质粒干粉
产品规格：质粒干粉
如需该质粒图谱质粒序列质粒属性等信息可以联系客服索取。www.yajimall.com
亲爱的科研工作者，感谢您信任雅吉生物，我们致力于为大家分享质优价适的质粒，受各种因素影响，我们只保证质粒的关键序列测序正确，不能保证实验效果。请您收到质粒后请务必先转化，再挑取单菌落扩增，不要直接使用。如果您需要即用的大包装质粒或病毒颗粒，可委托我们制备，性价比更高。
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学，通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户的厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉，为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门的全方位的服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，公司总投资超过2000万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
pDsRed2-LAMP1质粒，产品图例：
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片：
更多产品可查询官网或咨询客服：pDsRed2-LAMP1质粒
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文献和实验(RabS)作用下与溶酶体融合形成自噬溶酶体的过程，有些溶酶体相关蛋白也参与了其中，包括 LAMP1、LAMP2、UVRAG (紫外线抵抗相关肿瘤抑制基因）。而在降解阶段自噬体蛋白也发挥了重要作用，如 Atg22、Atg12、Atg15、Atg1、Atg13 等。细胞自噬的调节是一个多步骤的极其复杂的过程，目前机制尚未完全掌握，已知它主要是通过mTOR 信号通路、Beclin-1 信号通路、P53 信号通路三条途径来进行调控的。 1） mTOR 信号通路：mTOR 是是一个丝/苏氨酸
啦之类的那一块。这家伙是得了炸药奖的。Clontech公司构建了大量荧光定位质粒，如pEGFP-N1，pDsRed2-N1，pDsRed-Monomer-C1等等。 萤光，英文luminescence，即发光或称生物发光，是指萤火虫荧光素酶，海肾荧光素酶等在底物存在（实际上还需要ATP,氧，辅酶A等，这些试剂盒中已经加入）下发出的光，是生物化学反应，他的实质是酶，没有底物是不能发光的。把LUC利用的最好的是PROMEGA公司，他们有大量试剂盒是基于这两种荧光素酶的，最常见的是检测启动子或增强子活性
荧光蛋白 pEGFP-C2 哺乳细胞质粒 Kan 真核表达载体,表达EGFP绿色荧光蛋白 pEGFP-C3 哺乳细胞质粒 Kan 真核表达载体,表达EGFP绿色荧光蛋白 pDsRed2-ER 哺乳细胞质粒 Kan 真核表达载体,表达Dsred2红色
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