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- XK-SJH-A444
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Beta-amylase test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
β-淀粉酶（β-amylase，β-AL）试剂盒
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
淀粉酶负责水解淀粉，主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。
测定原理：
还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐热。根据上述特性，钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。试剂的组成和配制：
试剂一：50mL×1 瓶，常温保存，若有黄色晶体析出，需 90℃加热溶解后再用； 试剂二：40mL×1 瓶，4℃保存，若有沉淀析出，需 70℃加热后再用。粗酶液提取：
组织：称取 0.1~0.2g 样本（建议称取约 0.1g 样本），加入 1mL 蒸馏水，研磨匀浆；将匀浆倒入离心管中，提取液在室温下放置提取 15min，每 5min 振荡 1 次，使其充分提取；3000g， 25℃离心 10min，取上清液加蒸馏水定容至 10 mL，摇匀，即淀粉酶原液。吸取上述淀粉酶原液 1mL，加入 4mL 蒸馏水，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于（α＋β）淀粉酶总活力的测定。
血清（浆）等液体样本：（1）直接检测 α-淀粉酶。（2）吸取淀粉酶原液 1mL，加入 4mL 蒸
馏水，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于（α＋β）淀粉酶总活力的测定。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。2、 试剂一和试剂二 40℃预热 10min。
3、测定操作表：
| 试剂名称（μL） | α-淀粉酶活力测定 | 总淀粉酶活力测定 | ||
| 对照管 | 测定管 | 对照管 | 测定管 | |
| 淀粉酶原液 | 250 | 250 | ||
| 淀粉酶稀释液 | 250 | 250 | ||
| 蒸馏水 | 250 | 250 | ||
| 试剂二 | 250 | 250 |
| 试剂一 | 500 | 500 | 500 | 500 |
A4。
相关图片：
酶活性计算：
1、标准条件下测定回归曲线为 y=3.7215x -0.1778； x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。2、α-淀粉酶活性
- 按照样本质量计算
α-淀粉酶活性(mg/min/g 鲜重)=[(A2-A1＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=1.075×(A2-A1＋0.1778)÷W
- 按照蛋白质含量计算
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(A2-A1＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷（V 样×Cpr）÷T
=0.1075×(A2-A1＋0.1778) ÷Cpr
- 血清（浆）等液体样本中 α-淀粉酶活性计算
α-淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(A2-A1＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷V 样÷T=0.1075×(A2-A1＋
0.1778)
3、总淀粉酶活性计算
- 按照样品质量计算
总淀粉酶活性(mg/min//g 鲜重)=5×[(A4-A3 ＋ 0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T=5.375×(A4-A3＋0.1778)÷W
- 按照蛋白质含量计算
总淀粉酶活性(mg/min/mg prot)=5×[(A4-A3＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷（V 样×Cpr）÷T
=0.5375×(A4-A3＋0.1778) ÷Cpr
- 血清（浆）等液体样本中总淀粉酶活性计算
=0.5375×(A4-A3＋0.1778)
4、β-淀粉酶活性计算
- 按照样本质量计算
β- 淀 粉 酶 活 性 (mg/min/g 鲜 重 )= 淀 粉 酶 总 活 性 -α- 淀 粉 酶 活 性 =[5.375×(A4-A3 ＋
0.1778)-1.075×(A2-A1＋0.1778)]÷W
- 按照蛋白质含量计算
β- 淀粉酶活性（ mg/min/mg prot ） = 淀粉酶总活性-α- 淀粉酶活性=[0.5375×(A4-A3 ＋
0.1778)-0.1075×(A2-A1＋0.1778)]÷Cpr
- 血清（浆）等液体样本中 β-淀粉酶活性计算
β- 淀 粉 酶 活 性 （ mg/min/mL ） = 淀 粉 酶 总 活 性 -α- 淀 粉 酶 活 性 =0.5375×(A4-A3 ＋
0.1778)-0.1075×(A2-A1＋0.1778)
5：总淀粉酶稀释倍数；V 反总：反应体系总体积，0.5mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.25 mL；V 样总：提取液总体积，10 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，5min。
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
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