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- XK-SJH-A521
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
69
- 英文名：
α-L-Arabinofuranosidase (α-L-Af) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Arabinofuranosidase, α-L-Af） 试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
α-L-Af 是一种能够水解非还原呋喃阿拉伯糖残基的糖苷酶类，使细胞壁阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不断解离，促进果胶的增溶和降解。由于果实成熟过程中常常伴随着阿拉伯糖的丧失，该酶活性在果实成熟软化中的研究具有重大意义。测定原理：
α-L-Af 分解对硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成对-硝基ben酚，后者在 400nm 有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 α-L-Af 活性。自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。2、样本测定（在 EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 试剂一 | 200 | |
| 蒸馏水 | 200 | |
| 试剂二 | 250 | 250 |
| 样本 | 50 | 50 |
| 试剂三 | 1000 | 1000 |
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标准条件下测定的回归方程为 y =0.00585x -0.0027；x 为标准品浓度（nmol/mL），y 为吸光值。
- 按样本蛋白浓度计算：
α-L-Af 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反总]÷(V 样×Cpr)÷T
=39.89×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
α-L-Af 活性(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=39.89×(ΔA+0.0027) ÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
α-L-Af 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总)÷T
=0.08×(ΔA +0.0027)
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.5mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g； 500：细胞或细菌总数，500 万；T：反应时间，30min。
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文献和实验C5 H10 O5 。戊糖的一种。 D-阿拉伯糖除含于一部分植物糖苷中外，几乎在自然界中是找不到的，而 L-阿拉伯糖则以植物界为中心广泛分布着，在松或杉的心材中呈结合状态或游离状态存在。植物树胶多数也是以 L-阿拉伯糖为主要成分的多糖。一般植物细胞作为细胞外间质成分而合成分泌的杂多糖常含有 L-阿拉伯糖。与 D-木糖是 4-差向异构体的关系，在生物体内经由α -D-葡萄糖 -1-磷酸→ UDP-D-葡萄糖→ UDP葡糖醛酸→ UDP－ D-木糖，由特异的差向异构酶的反应生成 UDP
组。作者随后构建了体内、体外银屑病模型，用 L- 薄荷醇处理，出现了类似于 PP6 的结果，即 L- 薄荷醇能促进角质形成细胞中 Hes1 蛋白的表达，但不影响其转录。进一步研究发现，L- 薄荷醇能够通过抑制蛋白酶体对 Hes1 蛋白的降解进而增加 Hes1 蛋白的水平。 图 4 L- 薄荷醇靶向角质形成细胞中的 Hes1 并且上调其表达 作者使用 K5. Hes1fl/fl 和 Hes1fl/fl 小鼠作为研究工具，发现表皮细胞缺失 Hes1 能加重 IMQ 诱导的小鼠银屑病表型，即 K5
L-氨基酸氧化酶，存在于肾脏 肝脏 霉菌、蛇毒、细菌等中，为直接氧化 L-氨基酸的需氧性脱氢酶。 EC1． 4． 3． 2．如果不存在过氧化氢酶，则以 H2 O2 脱羧形成酮酸。 其辅酶是 FMN或 FAD。底物专一性广泛，能很好地氧化亮氨酸、甲硫氨酸等，但不作用于天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸等。但是，鸟类肝脏的酶对碱性氨基酸具有专一性。不过，由于活性低，因此动物的酶对氨基酸代谢是否有意义尚属疑问。但对 L-α -羟酸的氧化活性
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