- ￥980
- Xkbio
- XK-SJH-A373
- 国产
- 2025年07月16日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Aconitase (ACO) activity detection kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8°C
- 规格：
100管/96样
顺乌头酸酶（ACO）活性检测试剂盒
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
顺乌头酸酶（aconitase），三羧酸循环中的酶，催化柠檬酸转变为异柠檬酸。柠檬酸本身不易氧化，在顺乌头酸酶作用下，通过脱水与加水反应，使羟基由β碳原子转移到α碳原子上， 生成易于脱氢氧化的异柠檬酸，为进一步的氧化脱羧反应作准备。
测定原理
ACO 催化柠檬酸转化成异柠檬酸，异柠檬酸氧化脱羧将 NAD+ 还原生成NADH，导致 340nm处光吸收上升。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制
试剂一：100mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：20mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂三：1.5mL×1 支，-20℃保存； 试剂四：液体 20mL×1 瓶，4℃保存； 试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；试剂六：粉剂×1 支，-20℃保存；临用前加 1.5mL 蒸馏水充分溶解；现配现用试剂七：粉剂×1 支，4°保存；临用前加 12mL 试剂四充分溶解；
工作液：临用前在 12mL 试剂七中加入 1mL 蒸馏水、1mL 试剂四、1mL 试剂五、1mL 试剂六充分混匀
样本的前处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1、 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、 将匀浆转入离心管内 600g，4℃离心 5min。
3、 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。
4、 上清液即胞浆提取物，可用于测定胞质顺乌头酸酶活性。
5、 在步骤④的沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率 20％或
200W，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），用于线粒体顺乌头酸酶活性测定。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。2、 样本测定
（1）将工作液，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min；现配现用；若分次用将工作液分装后于-20°保存，一星期内可用。
（3）在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 40μL 样本 160μL 工作液，混匀，立即记录 340nm
处 20s 时的吸光值 A1 和 3min20s 后的吸光值 A2，计算ΔA=A2-A1。ACO 活性计算
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算
ACO 活性（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V 样) ÷T=268×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
ACO（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=54×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算
相关图片：
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算
ACO 活性（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=536×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
ACO（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总)÷T=108×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算
ACO 活性（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T=0.216×ΔA V 反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.04 mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL； T：反应时间，3min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【求助】核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65: 是不是一定要做标准曲线啊
tasthma 请问有没有那位战友用过activ motif 公司的核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65啊？我想请教一下，是不是一定要做标准曲线啊？ zhujoker 这种试剂盒一般都是需要做标准曲线的。 tasthma 谢谢版主！那我还得买他们的标准蛋白才行啊 zhuqueleee 没有必要的。 我当时用的就是这个试剂盒，因为到最后数值
joo 如题，要做衰老，没有决定定哪家的SA-bata-gal的检测试剂，请教大家都用什么呀？另外看到碧云天很便宜，谁用过他家这个产品吗？ joo 求助！ joo 自己顶！ zmz_1 I am using this in Boston, works very well. check the data sheet. applied
正规称为乌头酸水合酶。在三羧酸循环中，催化柠檬酸和异柠檬酸之间相互转换的辅酶。 EC4． 2． 1． 3。 的平衡条件下，三种物质的比例是 91∶ 3∶ 6（乌头酸酶平衡）。广泛分布于动植物和微生物中，肝脏、肾脏、肌肉、前列腺中含量特别高。曾经认为它与延胡索酶是同一种酶，还认为上述反应中涉及二种不同的酶，现在已经明确是由单一的酶催化的。酶活性可为反乌头酸、氟化柠檬酸强烈所抑制。此酶的反应机制在于通过价铁 -柠檬酸复合体以高度特异的三点结合
技术资料