- ￥1580
- Xkbio
- XK-SJH-A339
- 国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Transhydrogenase-1 kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
线粒体转氢酶-1（TH-1）试剂盒
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
TH 位于线粒体的内膜上，又称为呼吸电子传递链复合体六，催化 NADH+NADP+和NAD++NADPH 相互转化。催化正向反应称为 TH-1。线粒体 NADH 含量增加时会导致线粒体膜的 H+电化学梯度升高，因而促进了电子传递链上 ROS 的产生。TH-1 促进NADH 转换为 NADPH，从而提高线粒体的抗氧化能力。
测定原理
NADH 和 NADPH 均在 340nm 有特征吸收，因此 TH 催化的转氢反应不能导致 340nm 吸光度发生变化。用人工合成底物 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸（APADP+）替代 NADP+， TH-1 催化 APADP+还原生成的 APADPH 在 375nm 有特征光吸收，因此通过测定 375nm 光吸收增加速率，来计算 TH-1 活性。需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制
试剂一：液体 100mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：液体 50mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂三：液体 18mL×1 瓶，4℃保存； 试剂四：粉剂×1 支，-20℃保存；试剂五：粉剂×1 支，-20℃保存；
样本的前处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：① 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g，4℃离心 5min。
③ 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11100g，4℃离心 10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的 TH-1（此步可选做）。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体，加入 500uL 试剂二，超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W， 超声 3s，间隔 10 秒，重复 30 次），用于 TH-1 活性测定。
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测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 375nm，蒸馏水调零。2、 样本测定
- 工作液的配制：临用前将试剂四、五转移到试剂三中混合溶解，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
- 在微量石英比色皿或96 孔板中加入20μL 样本和180μL 工作液，混匀，立即记录375nm
TH-1 活性计算
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算
TH-1 活性（nmol/min /mg prot）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr)÷T=149×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
TH-1 活性（nmol/min /g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=74.5×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算
TH-1 活性（nmol/min /mg prot）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr)÷T=298×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
TH-1 活性（nmol/min /g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=149×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算
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本文主要介绍 ELISA 试剂盒、实验样本、相关问题，帮助大家更好地开展实验 试剂盒 Q1：科研试剂盒与临床试剂盒的区别 ？ A1：临床试剂是经过权威机构认可的，如 FDA、CFDA 等；而科研试剂一般是厂家自主研制，不需要通过权威机构验证。 经营临床诊断类产品的机构需要取得《医疗器械经营企业许可证》；经营科研试剂的机构不需要此证件。 临床试剂盒一般仅用于检测人血清/血浆等较为单一的分泌性样本类型；科研试剂盒的样本检测种类、检测范围则比临床试剂盒宽广得多。但一般来说，临床试剂盒的质量
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