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单宁含量试剂盒

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  • 2025年07月16日
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      100

    • 英文名

      Tannin content kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/96样

    产品细节图片1
    单宁含量试剂盒


    微量法 100 管/96 样

    正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

    测定意义:

    单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种生理活性,如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用; 具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。

    测定原理:

    单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在 760nm 处有最大吸收峰。

    需自备的仪器和用品:

    可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵和蒸馏水。

    试剂的组成和配制:

    试剂一:液体 4mL× 1 瓶,4℃保存; 试剂二:液体 3mL × 1 瓶,4℃保存; 单宁的提取:
    按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL蒸馏水),充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min, 8000  g,25℃离心 10  min,取上清液待测。

    测定步骤:

    1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 760nm 处,蒸馏水调零;试剂一和试剂二 37℃预热 10min 以上;
    2、操作表:
    试剂名称(µL) 对照管 测定管
    样本   5
    蒸馏水 135 130
    试剂一 35 35
    混匀,室温静置 5min
    试剂二 30 30
    混匀,室温静置 30min,760nm 处读取吸光值 A,ΔA=A 测定-A 对照,对照管只要做一管。

    相关图片:
    产品细节图片2产品细节图片3
     
     

    单宁含量计算:

    1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下:
    1、标准条件下测定的回归方程为 y = 1.6418x +0.0134;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为ΔA(A 测定-A 对照)。
    2、按样本鲜重计算:
    单宁含量(mg /g 鲜重)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(W×V1÷V2)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。
    3、按样本蛋白浓度计算:
    单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。
    V1:加入样本体积,0.005mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本鲜重,g。
    1. 用 96 孔板测定的计算公式如下:
    1、标准条件下测定的回归方程为 y = 0.8209x+0.0134;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为ΔA(A测定-A 对照)。
    2、按样本鲜重计算:
    单宁含量(mg/g 鲜重)=[(ΔA-0.0134)÷0.8209×V1]÷(W×V1÷V2)=1.218×(ΔA-0.0134) ÷W。
    3、按样本蛋白浓度计算:
    单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134)÷0.8209×V1]÷(V1×Cpr)=1.218×(ΔA-0.0134)÷Cpr。
    V1:加入样本体积,0.005mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本鲜重,g。
    注意:
    1、 ΔA 控制在 0.02-0.5 范围内,若ΔA 大于 0.5,将样本提取上清液用蒸馏水稀释 10 倍后检测,计算公式中乘以相应稀释倍数。
    2、 标准曲线线性范围为:0.025mg/mL-0.5mg/mL。


    产品细节图片4

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