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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Hydroxyl radical scavenging ability test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样
羟自由基清除能力测定试剂盒
微量法 100T/96S
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义:
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。测定原理:
H2O2/ Fe2+ 通过Fenton 反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质 2, 3-二羟基苯甲酸,在 510nm 处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。自备实验用品:
恒温水浴锅、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。试剂组成和配制:
试剂一:液体 12mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:液体 12mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂三:液体 22 mL×1 瓶,4℃避光保存。样品的制备:- 组织:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
- 血清、果汁等液体样品可直接测定。
- 提取物(或者药物)可配制成一定浓度,如 5 mg/mL。
操作步骤:
1、 酶标仪预热 30min,调节波长至 510nm。2、 在 EP 管中加入如下试剂
| 对照管 | 空白管 | 测定管 | |
| 试剂一(µL) | 100 | 100 | 100 |
| 试剂二(µL) | 100 | 100 | |
| H2O(µL) | 500 | 600 | 300 |
| 试剂三(µL) | 200 | 200 | 200 |
| 样本(µL ) | 200 | ||
| 混匀,37℃保温 20min,吸取 200μL 于 96 孔板中测定 510nm 处吸光值,对照管、空白管和 测定管的吸光值分别记为A 对、A 空和A 测。 相关图片: ![]() ![]() |
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注意:空白管和对照管只需测定一次。计算公式:
羟自由基清除率 D% =(A 对-A 测)÷(A 对-A 空)×100% A 对、A 空、A 测:对照管、空白管和测定管的吸光值。注意事项:为了比较不同样品羟自由基清除能力,对于同一批样品必须加入等量的样品,血清、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积,提取物(或者药物)配制成同样浓度。
羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
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