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- Xkbio
- XK-SJH-A245
- 国产
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Diamine oxidase test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
二胺氧化酶生化试剂盒说明书
微量法 50管/24样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物（肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等）、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛，其活性与核酸和蛋白合成密切相关，能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理：
DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢，外源添加过量的辣根过氧化物酶，催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质，在460nm处有特征吸收峰，通过测定该波长吸光度增加速率，计算DAO活性。
需自备的仪器和用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。
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酶活性计算公式：
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算：
所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
DAO 活性（nmol/min/mg prot）=
A460 ×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T= 18×A
÷Cpr
- 按样本质量计算：
´ d
460
的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO 活性（nmol/min/g 鲜重）=
A460 ×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）÷T= 18×A ÷W
- 按细胞数量计算：
´ d
460
所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO 活性（nmol/min/104cell）=
A460 ×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量）÷T= 18×A ÷
细胞数量
´ d
460
(4) 按液体体积计算
酶活性定义：在 pH7.2，温度为 37℃条件下，每毫升血清每分钟催化产生 1nmol H2O2 所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO 活性（nmol/min/mL）=
A460 ×V 反总÷V 样÷T= 18×A
460
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算：
所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
DAO 活性（nmol/min/mg prot）=
A460 ×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T= 36×A
÷Cpr
- 按样本质量计算：
´ d
460
的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO 活性（nmol/min/g 鲜重）=
A460 ×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）÷T= 36×A ÷W
- 按细胞数量计算：
´ d
460
所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO 活性（nmol/min/104cell）=
A460 ×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量）÷T= 36×A ÷
细胞数量
(4) 按液体体积计算
´ d
460
需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO 活性（nmol/min/mL）=
A460 ×V 反总÷V 样÷T= 36×A
460
ε：氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数：7.5 L /mmol/cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V 反总： 反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，30min
注意事项：
1、如果 OD 值小于 0.01，适当加大提取用样本量；OD 值大于 0.8，粗酶液可适当稀释，或者减少提取用样本量。2、样品蛋白质含量需要另外测定。
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
的特异性产生是由于抗原决定簇决定，抗体产生的过程也比较复杂，特别是小分子抗原必须偶联到载体蛋白上才能产生抗体。 ELISA测定结果的表现形式: 物质浓度：单位主要是μg/mL。 二、从微观角度来看 某一物质的抗原决定簇的活性位点(或者抗原抗体特异性结合位点)，与化学反应的活性位点可能存在差异。 三、总的来看 针对同一指标，生化试剂盒和ELISA试剂盒的检测结果趋势是正相关、负相关还是不相关的问题，需要更高技术设备和方法，以及大量的实验数据来验证。从原理中也说明了ELISA试剂盒分种属，而生化试剂盒
人二胺氧化酶 (DAO) 酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本 中 二胺氧化酶 (DAO) 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人 二胺氧化酶 (DAO) 水平。用纯化的 人 二胺氧化酶 (DAO) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 二胺氧化酶 (DAO) ，再与 HRP 标记
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