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- XK-SJH-A628
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Soil alkaline protease (S-ALPT) test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100T
土壤碱性蛋白酶（Solid - Alcalase Protease，S-ALPT）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在碱性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。测定原理：
碱性条件下，S-ALPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在 680nm 有特征吸收峰。实验中所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、蒸馏水。试剂组成和配置：
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 6ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 2mL 试剂七，沸水浴加热溶解，然后加入 8ml
试剂一，充分混匀备用，用不完的试剂 4℃保存；
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 40ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃ 保存；
试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液； 试剂七：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。测定操作：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 680nm，蒸馏水调零。2、试剂二、三和四 40℃水浴 10min。
3、样本测定：
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
| 风干土样（g） | 0.04 | 0.04 |
| 试剂一（μL） | 300 | |
| 试剂三（μL） | 300 |
|
|
注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
相关图片：
S-ALPT 活性计算：
单位定义：每天每 g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个 S-ALPT 活力单位。S-ALPT(mg/d/g 土样)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=24×(A 测定管
-A 对照管)÷A 标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.4mL；T：反应时间，
30min=1/48d； W：样本质量，0.04g。
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文献和实验方式：手动匀浆、机械匀浆 手动匀浆：将样本（含匀浆介质）倒入玻璃匀浆管中，匀浆管下端插入盛有冰水混合物的容器中，将捣杆垂直插入匀浆管，上下转动研磨数十次（6~8分钟），使组织匀浆化。机械匀浆：将已称重的组织装入EP管，加入匀浆介质，用组织匀浆机，在低温条件下，60 Hz，90 s研磨制成组织匀浆。（皮肤、肌肉组织及植物组织等可适当延长匀浆时间）。 注：组织匀浆后，取少量组织匀浆作涂片，显微镜下观察细胞是否破碎，若没有，可适当延长匀浆时间。生化实验一般不推荐用裂解液进行裂解。 样本保存：组织
1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
变异都可成为 R型细菌。具有明显多糖荚膜的菌种（例如肺炎双球菌）则同时伴有荚膜的消失，当然由此所产生的特异性抗原也同时随之消失。在细菌表面出现其他物质，如蛋白性抗原非常明显时，也可见到与其相应的不同变异（例如 Streptococcus，脾脱疽菌）。如果是富于鞭毛的细菌，此时运动变为不活泼，甚至停止。如系病原菌，常常表现为毒性锐减，生化反应也有变化。这些变化常可由于各种外在因素的存在而得到加强。例如 Li 、酚、抗 S血清， S型特异性噬菌体等的存在可导致代谢产物特别是氨基酸的积累而使上述变化
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