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100
- 英文名:
Lysine (LYS) test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100T/96S
赖氨酸(lysine,Lys)含量测定试剂盒说明书
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
赖氨酸是人体必需氨基酸之一,能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用。赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。
测定原理:
蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的 ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮氨酸配制标准液。需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水、水浴锅。试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 12.5mL 试剂三充分溶解混匀; 试剂二:液体 12.5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存; 试剂四:60%乙醇,自备。
赖氨酸提取:
样本烘干粉碎,称取约 0.01g 样本,加入 1mL 提取液,充分匀浆。80℃水浴提取 20min,冷却后 10000g 离心 10min,取上清待测。相关图片:

测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 530nm,蒸馏水调零。2、 工作液的配制:取 10mL 试剂一与 10mL 试剂二混合摇匀,取上清备用。用不完的试剂
4℃保存。
3、 在有盖 EP 管中加入下列试剂:
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 空白管 |
| 样本 | 100 | |
| 提取液 | 100 | |
| 工作液 | 200 | 200 |
| 试剂四 | 300 | 300 |
测定管-A 空白管。空白管只要做一管。
赖氨酸含量计算:
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr
- 按照样本质量计算
=185.73×(△A+0.0212) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1.1515,校正系数。
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
=371.45×(△A+0.0212) ÷Cpr
- 按照样本质量计算
=371.45×(△A+0.0212) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1.1515,校正系数。
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文献和实验前景和不断完善的经营模式,会为更多的客户提供更完美的,更贴心的服务。二:我们的专长(1)普通线性肽,链长至120个氨基酸,毫克至克级,纯度可达99%(2)简单修饰肽:免费提供N端乙酰化,末端酰胺化(3)C端:酰胺化(NH2),生物素标记 (用赖氨酸侧链连接),PEG2(用赖氨酸侧链连接), C-FITC(用赖氨酸侧链连接),C-AMC N端:乙酰化(AC),生物素标记(Biotin),脂肪酸修饰(Pal, Myr),罗丹明标记, N-FITC,N-5
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