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MC-38-LUC细胞
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MC-38/LUC
1x10^6/cell
上海酶研
结肠癌
小鼠结肠癌带荧光素酶:MC-38/luc
小鼠
贴壁/悬浮
是
顺丰快递
5年
生长良好
瓶
MC-38/LUC、MC-38/LUC、MC-38/LUC小鼠结肠癌带荧光素酶:MC-38/luc取细胞冻存管一支,于40°C水中速融;25ml细胞方瓶中加入含10%COSMIC小牛血清的DMEM-F12培养基10ml,将冻存管中细胞全部洗入瓶中,置37°C 2.5%二氧化碳孵箱中静置培养。4小时后倒去全部培养基以去除冻存液,更换10ml培养基,同上静置培养。经24小时培养后,生长情况为:经48小时培养后,细胞已长成致密单层:致密单层细胞在细胞瓶上呈雾状,使瓶壁呈半透明:弃去培养液,在此可先摇动细胞瓶,使老化死亡贴壁情况不好的细胞随培养液弃去。 加入0.25%胰酶后,细胞逐渐皱缩变圆,细胞间隙增大不再致密:刚加入胰酶,细胞仍呈致密单层:细胞开始皱缩但不明显,仍维持细胞正常形态:细胞明显皱缩变小,细胞间隙增大不再致密,部分细胞维持正常形态,部分细胞皱缩变圆:细胞基本皱缩变圆,此时细胞吹打可下:细胞完全皱缩变圆,此时应弃去胰酶,加入培养基后轻摇可将细胞从细胞瓶壁上洗下,将细胞悬液用吸管吹散后传代。有经验后,可肉眼对光观察帖壁半透明的细胞层,判断消化程度。如消化过头,会见到许多细胞脱落随弃去的胰酶溶液流失。也可以在倒数第二、三步时弃去胰酶,用瓶中残留的胰酶继续作用至最后一步的消化程度,这样略有点过也影响不大
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308 人阅读发布时间:2014-09-24 14:50
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