- ￥133
- Omega
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- 2025年08月07日
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miRNA Kit（5）
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文献和实验石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒(DP502) 操作指南
以下操作按照天根产品 DP502 石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 石蜡切片或石蜡块样本2. 无水乙醇，二甲苯3. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1 ml）； 1.5 ml，2.0 ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机，金属浴/水浴本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用
可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒，因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外，绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 （1）配制15%的尿素变性PAGE胶，可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液，60V预跑30min。 （2）将样品与RNA loading buffer按比例混合，70℃预热5min，立即放置冰上。 （3）上样前，用缓冲液冲洗点样孔，防止点样孔中的杂质影响电泳。 （4）点样时，使样品均匀铺在点样孔底部
1. RNA提取 在以上两种RT引物中，Ologod（T）特异引物所需要的RNA尽量是用特殊试剂盒提取的小RNA，而茎环状结构RT引物需要RNA正常提取就好。 另外由于所需样本不同RNA提取方法也不完全相同，普通组织样本和细胞可以研磨用Trizol+氯仿抽提；血液和植物样本需要前期处理后再用Trizol+氯仿或用专门的Kit抽提。 2. 反转录 确认用Oligod（T）特异RT引物时，RNA需要进行3'Poly（A）加尾处理。 反转录的酶没有特殊要求，操作请按照各自反转录酶的说明书
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