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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃冻存
- 供应商:
LABLEAD
- 规格:
500U
产品货号:T0202
储存条件:-20 ℃ 保存。浓度: 5U/µl。
产品简介
Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化的,其分子量为94 KD。Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性,无3′-5′外切酶活性。在PCR反应中,Taq DNA Polymerase 延伸速度为1-2 kb/分钟,产物3′端带A,可直接用于T/A载体克隆。
产品组成
Taq DNA Polymerase 500U
10xTaq Buffer+(with MgCl2) 1ml
活性单位
1单位(U) Taq DNA Polymerase活性定义为在74C、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制
SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液
20mMTris-HCl (pH8.0),0. 1 mM EDTA,1mMDTT, 100 mM KC1,Stabi lizers,50% glycerol.
10XTaq Buffer (含 Mg2):
200 mM Tris-HCl (pH 8.4), 200 mM KC1, 100 mM(NH)z SO, 15 mM MgCl2, 其他成分。
★ 10X Taq Buffer分为含Mg°2+和不含Mg2+两种,可自选。
★ 不含Mg2+的Buffer,另外配有25 mM MgCl2。
★ 如果没有特别指定,通常提供的为含有Mg2+的Buffer。
适用范围
一般用于DNA片断的PCR扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。
建议的PCR条件: (以 50 u1反应体系为例)
Template <0.5 μg
Forward Primer (10 μ M) 1 μl
Reverse Primer (10 μ M) 1μ1
10XBuffer* (with mgcl2) 5 μl
dNTP Mixture(各 2.5mM) 4 μl
Taq DNA pol ymerase(5U/μ 1) 0.5~1 μ 1
dH20 upto50μ1
PCR反应循环的设置:
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本品仅用于实验研究。
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文献和实验of a master mix containing water, buffer, dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase in a single tube, which can then be aliquoted into individual tubes. MgCl2 and template DNA solutions are then added. This method of setting reactions minimizes the possibility
使用 Platinum® Taq DNA 聚合酶 (Platinum® Taq DNA Polymerase),对靶序列进行定性验证
实验步骤 The procedure on the following page is suggested as a guideline and starting point when using Platinum® Taq DNA Polymerase in any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubation times and temperatures
out the E.coli strain carrying the Taq polymerase gene on an LB amp plate and innoculate a 5 ml overnight culture with a single colony.• Innoculate a 1 liter culture of LB-amp with the 5 ml of overnight culture and grow to an A600 of 0.2.Add IPTG to a final
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