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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
科研细胞
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
IM9
- 生长状态:
贴壁
- 年限:
详询
- 运输方式:
根据客服要求
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详询
- 细胞形态:
上皮样
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
B淋巴细胞;女性
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详询
适用范围:
本产品仅限于科学研究,绝不可作为人类或者动物疾病的治疗产品使用。
细胞特性:
1) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
2) 含量:>1x10^6
3) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4) 来源:见说明
5) 形态:请直接向我司客服索取
1)运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
1.干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
2.存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
3.收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞接受后的处理:
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的的完全培养基。
4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
ATCC是全球首屈的生物材料资源和标准组织,其使命主要集中在标准参考微生物,细胞系和其他材料的获取,鉴定,生产,保存,开发和分销。在保持传统收集材料的同时,ATCC开发出高质量的产品,标准和服务,以支持改善全球人口健康的科学研究和突破。
晅科生物致力于为国内科研用户提供Z优质的产品,最完善的服务。帮助您实验顺利。
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文献和实验人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血,用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释,上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中,先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液(1.077 g/mL),再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液,血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注:Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温,温度过高会导致分离不明显,温度过低会导致密度过大,同样分离效果不好, 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
。如果直接倒掉,离心管内会有残留裂解液,后续加入100 μL PBS重悬细胞时,可能不能完全稀释裂解液,导致红细胞裂解过度。 6. 细胞沉淀重悬,可用枪轻轻吹打,或者用转速小的涡旋仪涡旋。 7. 人血样本建议染CD45,有利于后续数据分析时圈门。 8. 处理人血样本时,推荐设置只染CD45的单染管低速上机用来设置阈值,观察细胞量,圈淋巴细胞群。 9. 人外周血中主要含T淋巴细胞,B淋巴细胞的量较少。如果使用病人的血液样本,B淋巴细胞的量可能更少,因此B淋巴细胞的检测不推荐使用过夜的样本,过夜样本易导致
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100










