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- 2025年07月10日
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文献和实验SDS-PAGE Western Blotting Protocols
Adapted from existing protocols by Vinh Pham Last modified: June 5, 2003. MATERIALS All materials required are mentioned within the respective sections below. PROCEDURE Part I – Sample Preparation 1. Collect
，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，最好选兔源的一抗，则二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。 如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况，除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法，则抗体宿主物种的影响不大，如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测，尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链
blotting检测，尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot检测中则结合出现IgG分子50 and 25 kDa的重链和轻链条带。 4. 内参选择 三、抗体的保存 1. 抗体的稳定性 （1）抗体的稳定性是自然界长期进化的结果。抗体是免疫系统中最重要的分子之一，其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构。 （2）抗体分子的高Tm值。在室温
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