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- 2025年07月11日
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文献和实验混匀，使之中和。 4、加75ml无水乙醇，充分混匀后，置于干冰或-70℃沉淀10分钟。 5、于12000g离心10分钟，弃去上清，用200ml预冷的70%乙醇洗沉淀后，干燥沉淀，溶于20ml无离子水中。 （三）、测序反应： 1、引物和模板的退火： （1）在一离心管中，混合如下几种试剂： 引物 约1-2pmol 5×T7 DNA 聚合酶测序反应缓冲液 2ml DNA 约1mg 加ddH2 O终体积至10ml 。 （2）将试管盖盖上后，65℃ 加热2分钟，然后在大约30
ml无离子水中。 （三）、测序反应： 1、引物和模板的退火： （1）在一离心管中，混合如下几种试剂： 引物 约1-2pmol 5×T7 DNA 聚合酶测序反应缓冲液 2ml DNA 约1mg 加ddH2O终体积至10ml 。 （2）将试管盖盖上后，65℃ 加热2分钟，然后在大约30分钟左右的时间内，使试管的温度缓慢地降到室温。降温的过程中可使用小的加热板或小型的保温仪，也可使用已调至65℃的水浴，使它们的温度在室温下缓慢地降至室温即可。当温度降至30℃以下时，退火结束。可将小试管置于冰上
（1）在一离心管中，混合如下几种试剂： 引物 约1-2pmol 5×T7 DNA聚合酶测序反应缓冲液 2ml DNA 约1mg 加ddH2O终体积至10ml 。 （2）将试管盖盖上后，65℃ 加热2分钟，然后在大约30分钟左右的时间内，使试管的温度缓慢地降到室温。降温的过程中可使用小的加热板或小型的保温仪，也可使用已调至65℃的水浴，使它们的温度在室温下缓慢地降至室温即可。当温度降至30℃以下时，退火结束。可将小试管置于
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