- ￥4264
- 博尔森/BIOESN
- 中国/上海
- BES-Rb210
- 2026年08月28日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
相关阅读
AI 赋能培养基定制开发：CHO 培养基是如何实现产量提升Cytoscape 教程来了！快速实现顶刊同款通路网络图五大应用案例：Mustang Q 膜层析应用全解析1 个小工具，一次性搞定流程图、质粒图谱和信号通路图- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 细胞类型：
见详情说明
- 品系：
见详情说明
- 组织来源：
见详情说明
- 相关疾病：
见详情说明
- 物种来源：
兔
- 免疫类型：
见详情说明
- 细胞形态：
贴壁/悬浮
- 器官来源：
见详情说明
- 运输方式：
常温/干冰运输
- 年限：
见详情说明
- 生长状态：
优良
- 规格：
5×105cells/T25培养瓶
一、从液氮容器中取出原代细胞冻存管后，立即将细胞冻存管直接浸入37℃水浴中，在1－2分钟内摇动细胞冻存管至冻存的细胞融化。
二、用75％酒精消毒细胞冻存管后，小心打开盖子，用吸管吸出细胞悬浮液，接种到细胞培养瓶中，5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养。
三、12小时后，更换一次原代细胞培养液（全部液体），继续在5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养 。
注意事项
一、将冻存管从液氮容器中取出时，要做好防护工作，以免冻伤。
二、取冻存管后立即放入37oC水浴中，缩短解冻时间。
三、复苏最好用新配制的原代细胞培养体系。
原代细胞传代基本技术：
一、选用原代细胞生长状态好（90－95％），生长数量大于5×105进行传代。
二、吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS（pH7.4）清洗细胞培养瓶2次。
三、3ml细胞消化液加入细胞培养瓶，轻轻摇动，使细胞消化液覆细胞培养瓶底。
四、细胞培养瓶置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养2分钟后，在显微镜下观察原代细胞的消化状态。（平滑肌细胞建议只消化30s）
请记住：如贴壁细胞逐渐趋于圆形、部分悬浮后，用手指轻轻拍打细胞培养侧部至大部分贴壁细胞悬浮，加入3ml血清终止液，终止细胞消化。每种原代细胞的消化时间是有差异的。
五、吹打培养瓶中悬浮细胞若干次，再吸出细胞悬浮液，转入15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。
六、弃离心管中液体，加入原代细胞培养液重悬细胞。细胞计数，确定细胞数量。
七、细胞分瓶后，加入适量原代细胞培养液至细胞培养瓶中，置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养24小时。
原代细胞冻存基本技术：
一、选用原代细胞生长状态好（90－95％），生长数量大于5×105进行冻存。
二、原代细胞冻存24小时，须换液新鲜原代细胞培养液一次。
三、贴壁的原代细胞需常规用0.25％胰酶消化，将消化后的细胞悬液收集至细胞离心管中。
四、细胞离心管在1000rpm下离心5分钟，小心弃清液。
五、将细胞冻存液加入细胞离心管中，悬浮细胞。细胞计数调整至5×105/ml。
六、将悬浮细胞放置细胞冻存管中。密封细胞冻存管。 标明细胞种类和冻存日期。
请记住：封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。
请按下列顺序降温保存原代细胞：室温→4℃（60 分钟）→ 冰箱冷冻室（60 分钟）→ 超低温冰箱（－80℃过夜）→ 液氮。
原代细胞冻存液常用配方：50%完全原代细胞培养液（不含有血清、添加剂、双抗）+ 40%胎牛血清 + 10%DMSO
原代细胞免疫荧光鉴定：
一、原代培养的细胞用 4%的多巨甲醛，室温固15 min，0.1% Triton-X-100 透膜 10 min，PBS 清洗 3 遍，每5 min，
二、山羊血清室温封闭45 min，一抗 Insulin，兔多抗，使用浓度 1 ∶ 50；Glucagon 抗体，鼠单抗，使用浓度 1 ∶ 200；
Pancreatic Polypeptide（pp）抗体，兔多抗，使用浓度1∶200，4 ℃孵育过夜，PBS 清洗 3 遍，每次 5 min，
三、加入相应的二抗 Alexa Flour 594 （山羊抗兔）或FITC（山羊抗小鼠），室温避光孵育 45 min，PBS
清洗 3 遍，每次 5 min，
四、DAPI 复染核，PBS 清洗 3遍，每次 5 min，普通荧光显微镜下观察并照相.
五、实验结果：
Insulin（200X）：图中红色荧光为Insulin阳性，阳性率＞90%，即：细胞纯度＞90%
原代细胞培养客户须知：
一、请客户收到本公司原代细胞产品后，立即对物品包装、细胞培养瓶等拍照，如有疑问或问题，须在24小时内通知本公司，提供照片和书面说明。
客户收到非冻存原代细胞后，请将原装的原代细胞瓶放入细胞培养箱内培养，4-12小时后再使用。75ml培养液含添加剂，血清及双抗，可吸出70ml左右直接使用，无需过滤。注意观察细胞情况，待贴壁率达到90%以上再按传代说明操作。
二、请客户使用T25细胞瓶传代，一瓶传二瓶。
三、谨记：培养原代细胞前三天，需对原代细胞生长状态进行拍照并注明和标记时间。若原代细胞培养生长存在质量问题，需向本公司提供原代细胞培养生长的照片和书面说明。
四、请客户使用原代细胞第3代以内。原代细胞培养传代过多，可能造成原代细胞的质量问题。
本产品仅用于科学研究使用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验最近做了很多小鼠腹腔巨噬细胞， 有如下几个问题需要和大家讨论，望经验丰富的同志指点一二。 1. 关于是否注射淀粉肉汤或是别的刺激物， 是不是注射后有两大特点：第一，得到的细胞更多， 第二，得到的细胞都是炎性巨噬细胞， 而未注射则是非炎性细胞？ 我做了十来次， 有时注射有时不注射（淀粉肉汤）， 注射后细胞确实多一些。 至于炎性与非炎性，有待指教。 2. 关于分离的巨噬细胞的纯度问题。 我这里碰上一个严重的问题就是成纤维细胞的污染。 一开始纯化完铺板， 基本上看不到
目的要求 1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 基本原理 细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式，在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成，当病原微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，便向异物处聚集，巨噬细胞可将之内吞入胞质，形成吞噬泡，然后在胞内与溶酶体融合
实验材料： 1. 肺泡巨噬细胞来源：体重为2—3kg的成年兔。也可使用成年大鼠； 2. 灌洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.4； 3. 培养液：MEM培养液，添加谷氨酰胺1mmol/L、卡那霉素100µg/ml、青霉素200IU/ml、链霉素200µg/ml、HEPES 10mmol/L和10%胎牛血清； 4. 无菌手术器械：手术刀、解剖剪、解剖镊、止血
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
