小鼠肺癌细胞-荧光素酶标记

【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？谢谢

lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题，两者的区别我基本清楚了，只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒（分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因）呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话，是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因，还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件？谢谢 msniu

酶标记法检测细胞凋亡

(6)终止反应：移去盖玻片，将玻片置于盛有终止/洗涤液的染色缸内，37℃下洗涤30min(置摇床上振摇)。然后将玻片置于洗涤缓冲液内，洗2次，每次5min。        (7)地高辛抗体反应：用吸水纸吸干细胞或组织周围液体，滴加70μl过氧化物酶标记的地高辛抗体，均匀覆盖，加上塑料盖玻片，室温下置湿盒中孵育30min；       (8)洗涤：置于洗涤缓冲液内，洗2次，每次5min；       (9)用吸水纸吸干细胞或组织四周液体，滴加新鲜配制的DAB显色液，均匀覆盖，加盖塑料

细胞生长的ATP检测[荧光素酶法]

  1． ATP 反应液（ Bio-Orbit ）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、 0.5mmol 醋酸镁、 50mg BSA 和 0.1 μ mol 无机焦磷酸。在 4 ℃可以保存 1 个月。用前用 10ml 含 2mmol/L EDTA 的 0.1mol/L pH7.75 Tris- 醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－ 20 ℃长期保存。 2． 在已经完成促增殖或抑生长试验后的 96 孔细胞培养板中（每孔含 100 μ l 细胞培养液），每孔加 0.1ml