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- BNCC353535
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- 2025年09月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型：
贴壁生长
- 供应商：
北纳生物
- 库存：
33
- 英文名：
293T
- 生长状态：
贴壁生长
- 运输方式：
快递运输
- 器官来源：
胚肾
- 细胞形态：
CM1-1培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形，紧密排列
- 物种来源：
胚肾
- 组织来源：
胚肾
- 规格：
复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式;2ml冻存管2支
资源编号：BNCC353535
产品名称：人胚肾细胞
英文名： 293T
类型： 贴壁生长
形态： CM1-1培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形，紧密排列
分离基物： 胚肾；5型腺病毒及SV40转化；女性
提供形式： 复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式;2ml冻存管2支，干冰费另计。
安全等级： 1
应用领域： 表达SV40大T抗原，可用于转染和作为包装细胞；用于瞬时转染时可高表达AP融合蛋白。293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
传代方法 将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入2mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约1min取出。传代用6mL CM1-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；
生长条件 37℃，5%CO2，CM1-1培养液。CM1-1培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培养液，含谷氨酰胺，含丙同酸钠。
生长特性 细胞贴壁不牢，加胰酶消化时，细胞会成块脱落，几秒就要把多余的胰酶吸走，余0.5ml多消化一会。培养过程中增殖缓慢，细胞密度大概在70%左右。
存储条件 冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。
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文献和实验关于293/293T细胞1、种属都为人，不是鼠。2、来源：293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。3、形态为上皮细胞，能致瘤。4、染色体核型：亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30
包装细胞293T细胞的培养一、293T细胞的冻存1. 随着传代的次数增加，293T细胞会出现生长状态下降，出现突变等。所以要在细胞购进时就进行大量冻存，以保证实验的稳定性和持续性。2. 在细胞对数生长期进行冻存，增加细胞复苏成活率。3. 倒去细胞上清液，加入D-Hank's液洗去残留的培养基。4. 加入0.25%的胰酶，消化10-20s后倒去。5. 镜下观察细胞变圆，细胞间间隙加大时，加入新鲜培养基吹打混匀。6. 细胞计数。7. 将细胞离心，1000rpm，2min。8.根据计数结果加入
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