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冰冻
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Ceftezole Impurity M
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100
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上海汇谱仪器有限公司
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文献和实验复合模式层析原理 复合模式层析是一种集合多种类型的相互作用(如离子交换、疏水、氢键、嗜硫亲和等)于一种层析介质从而同时具备高选择性和高分辨率的层析技术。 图15 复合模式层析配基类型 特点 相较于传统层析模式具备更快的传质速率和更高的分辨率。 在高回收率条件下实现有效分离。 能够同时去除多种杂质,如多聚体、宿主蛋白、病毒、电荷异构体等。 适用于难以同时去除多种痕量杂质的层析需求。 层析介质 目前Cytiva共有四款复合模式层析介质: Capto™ Adhere系列可有
上清液,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。 组织匀浆 1) 用预冷的PBS(0.01M,PH7.4)冲洗组织以除去表面残留的血液或杂质(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)。 2) 将组织块称重,然后切成尽可能小的碎块,以便充分匀浆。 3) 加入适量的预冷PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂),用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复
」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点,「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷,能够加速大家的纯化之路,由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一:凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因:缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞;流速过快、流动相粘度(如乙醇等)过高、温度过低。 建议处理方法:首先卸柱子,确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了:参考说明书 CIP 操作进行清洁;更换层析柱顶端滤膜
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