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SIGMA P6556-25MG 蛋白酶K来源于林伯氏白色念

球菌 39450-01-6
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  • ¥689
  • Sigma-Aldrich
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  • P6556-25MG
  • 2025年07月11日
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    • 英文名

      Proteinase K from Tritirachium album

    • 库存

      有现货

    • 供应商

      浙江羽翔生物科技有限公司

    • CAS号

      39450-01-6

    • 规格

      25MG

    属性

    形式

    lyophilized powder

    质量水平

    300

    比活

    ≥30 units/mg protein

    分子量

    28.93 kDa

    技术

    DNA extraction: suitable

    溶解性

    H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless

    异质活性

    Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
    RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid

    运输

    wet ice

    储存温度

    −20°C

    单位定义

    一单位在37°C、pH 7.5条件下每分钟可水解尿素变性血红蛋白而产生相当于1.0μmole(181 μg)的酪氨酸显色(福林酚试剂显色)。

    应用

    P6556产品为冻干粉形式。P6556产品已可用于分解人晶状体蛋白。蛋白酶K消化的蛋白酶印迹可以揭示蛋白质与蛋白质表面的相互作用。Sigma的该酶已用于鸡胚的预杂交。它还被用来富集PrPSc,一种存在于羊、仓鼠和老鼠痒病样本中的朊病毒蛋白。
    在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
    用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
    据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
    用于测定酶在细胞膜上的定位
    用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
    用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
    在分离DNA和RNA的过程中,蛋白酶K对核酸酶的蛋白水解失活起作用。
    它被用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
    它可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
    ,并用于测定酶在细胞膜上的定位
    用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点,并
    用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。 P6556产品为冻干粉形式。 P6556产品已可用于分解人晶状体蛋白。

    生化/生理作用

    蛋白酶K具有广泛的特异性,即使在天然状态下也能降解许多蛋白质。它主要裂解脂肪族和芳香族氨基酸羧基附近的含有封闭α-氨基的肽键。最佳pH值在7.5-9.0之间,等电点为8.9,其活性激活需要Ca2+ (1-5 mM)。蛋白酶K可被二异丙基氟磷酸(DFIP)和苯JIA磺酰氟(PMSF)抑制。
    蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    Single-Cell Transcriptomic Profiling in Inherited Retinal Degeneration Reveals Distinct Metabolic Pathways in Rod and Cone Photoreceptors.

    International journal of molecular sciences (2022-10-28)
    Yiyi Chen, Yujie Dong, Jie Yan, Lan Wang, Shirley Yu, Kangwei Jiao, François Paquet-Durand
    PMID36293024
    摘要

    The cellular mechanisms underlying hereditary photoreceptor degeneration are still poorly understood. The aim of this study was to systematically map the transcriptional changes that occur in the degenerating mouse retina at the single cell level. To this end, we employed single-cell RNA-sequencing (scRNA-seq) and retinal degeneration-1 (rd1) mice to profile the impact of the disease mutation on the diverse retinal cell types during early post-natal development. The transcriptome data allowed to annotate 43,979 individual cells grouped into 20 distinct clusters. We further characterized cluster-specific metabolic and biological changes in individual cell types. Our results highlight Ca2+-signaling as relevant to hereditary photoreceptor degeneration. Although metabolic reprogramming in retina, known as the 'Warburg effect', has been documented, further metabolic changes were noticed in rd1 mice. Such metabolic changes in rd1 mutation was likely regulated through mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway. By combining single-cell transcriptomes and immunofluorescence staining, our study revealed cell type-specific changes in gene expression, as well as interplay between Ca2+-induced cell death and metabolic pathways.

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      Carnoy's Fix: 6 parts 100 % EtOH 3 parts CHCl3 1 part glacial acetic acid Carmine Alum Stain: Place 1 g carmine (Sigma C1022) and 2.5 g aluminum potassium sulfate (Sigma A7167) in 500 ml distilled water and boil for 20 min. Adjust final

    • Clonality - X Chromosome Inactivation Assay

      (Life Technologies) 10X PCR buffer (100 mM Tris-HCL pH 8.3, 500 mM KCL, 15 mM MgCl2, 0,01 % w/v gelatin, autoclaved) (Perkin Elmer) dNTP, each 10 mM (Perkin Elmer) 7-deaza dGTP, 10 mM (Boehringer Mannheim) DMSO, minimum 99.5%, GC (Sigma

    • 实验时间 | Transwell 侵袭实验总结

      我的课题涉及 Transwell 侵袭实验,因此在这里和大家分享 Transwell 侵袭实验。实验用品01 Transwell 小室我用的是 ECM554,用完后擦去基质胶,再用胰酶和 75% 酒精泡,可以把膜洗得很干净,用前用紫外里外都照 30 min。处理方法:用棉签轻轻擦去胶和反面细胞,清水冲洗,超声清洗,低档,30 min,清水 3×5 min,蒸馏水 3×5 min,室温凉干,用前紫外线小室正面 3 h,反面 6 h,微波,低火 10 min×2。因为我买的是铺好胶的,所以没买

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