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- 539480-100MG
- 2025年07月12日
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常温
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大量
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联硕生物
- CAS号：
39450-01-6
- 规格：
1瓶
一般描述
丝氨酸蛋白酶，对多种变性和天然的高分子量蛋白质具有很强的蛋白水解活性。它可使内源性核酸酶迅速蛋白水解失活，因此可用于分离mRNA和高分子量DNA。优先裂解N-取代疏水性、脂肪族和芳香族氨基酸羰基旁的键。可被DFP、Hg2+和PMSF抑制。不会被金属螯合剂、巯基试剂、TLCK或TPCK灭活。
应用
在分离DNA和RNA的过程中，对核酸酶的蛋白水解失活起作用。
在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
生化/生理作用
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。
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文献和实验来源: 源于白色念球菌(Tritirachium album) 反应条件: 蛋白酶K在较广的缓冲液pH范围(pH 4-12.5), 温度范围(37-60℃), 盐浓度(如: 3 M GuHCl)或尿素(4 M)条件下均有活性。在一些去污剂如: Tween20(5%), Triton X-100 (1%)和SDS(1%)条件下也有活性 比活性: 30 units/mg
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
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