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Prolite Orange是一种蛋白凝胶染料,可用于替代SYPRO Orange蛋白凝胶染料(SYPRO是ThermoFisher的商标)。 Prolite Orange是一种灵敏的即用型荧光染料,可在一维凝胶中检测总蛋白。 Prolite Orange的灵敏度比传统的银染技术更好。 可以使用标准的UV或蓝光透射仪或包含适当滤镜或激光的成像设备查看染色的蛋白质。 荧光染色快速且高度灵敏,可检测蛋白质电泳凝胶和膜中的总蛋白质。
产品说明书
样品分析方案
储存
存放在-20°C避光的地方。 按建议存放时,产品自收到之日起至少稳定12个月。 可用醋酸或缓冲液稀释的ProLite Orange可在4°C的玻璃或塑料瓶中保存三个月,避光。 打开之前,应先将每个小瓶加热至室温,然后在微量离心机中短暂离心,以将DMSO溶液沉积在小瓶底部。 如果存在染料颗粒,请短暂超声处理试管或剧烈涡旋试管。
工作溶液配制
ProLite Orange工作溶液(5000X)
用7.5%(v / v)乙酸稀释5000X ProLite Orange储备溶液,制成1X ProLite Orange储备溶液,并剧烈混合。
注意:工作溶液最多可以重复使用四次。 但是,我们观察到第二次重用后响应开始明显减少。 强烈建议使用全新的工作溶液以获得最佳效果。
操作步骤
建议使用以下方案,并且可以将其用作准则。但是,可能需要进行一些比较才能确定哪一种可以更好地满足您的需求。
电泳后染色蛋白
1.运行凝胶。
2.将工作溶液倒入一个小的塑料皿中。
注意:对于一到两个标准尺寸的小凝胶,请使用约50 mL的工作溶液。对于较大的凝胶,请使用500至700 mL的工作溶液。
注意:确保添加足够的工作量以完全浸没凝胶。
3.将凝胶放入工作溶液中。
注意:用铝箔盖住容器,以防止染料受光。
4.在室温下轻轻搅拌凝胶10至60分钟。
5.用7.5%的乙酸短暂冲洗。
6.可以在标准的300 nm紫外线透射仪或蓝光透射仪上观察凝胶。
7.脱色:大部分凝胶可通过在0.1%Tween®20中孵育过夜来脱色。或者,在7.5%乙酸的多种变化中孵育最终将去除所有污渍。
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