Infinity Line-STED超高分辨率显微镜

Infinity Line 专家型STED超高分辨率显微镜是一个复杂而高度灵活的开放平台，购买后也可以扩展和升级。

• 可调节针孔尺寸的多色共聚焦扫描系统
• 门控检测器
• 已有的光机设计，开放的电子和软件平台，随时可以实现您自己的成像想法
• 最佳性能-从 STED 显微镜中获得优异的分辨率
• QUAD 四光束扫描仪技术
• 我们为您的应用定制显微镜的功能，提供非常好的灵活性
• 我们会在您的实验室安装好现成的超分辨显微镜，同时包括软件/操作培训等，可直接使用。

Infinity Line 专家型 STED 超高分辨率显微镜可以与所有模块整合：
活细胞STED，DyMIN STED,RESCue STED,MINFIELD STED,自适应光学,775 STED,595 STED,easy3D STED,完全自动对齐,自动对焦STED,虹彩光谱检测,荧光寿命图像模块,透射照明,RESOLFT
 

荧光偏振成像

活细胞STED

记录活细胞本身就是一个挑战，而当对活细胞进行超分辨率成像时，又要同时处理许多事情，因此难度更大。

为了使您能够专注于获得最佳图像，Abberior Instruments提供了一个独特的活细胞功能包，包括STED 和RESOLFT 显微镜：

• 脉冲STED （波长分别在 595 nm / 775 nm）和自适应照明 RESCue STED:
• 它们结合在一起，将样本中的光照量降至绝对最小。
• 水浸物镜：使用最佳的水浸活样品。
• 长时程远程控制器：无需实验者，自动处理那些枯燥的深夜实验
• 连续STED自动对焦：保持锐利聚焦许多小时。
• 可使用恒温箱将样品加热至37°。
• 所有组件都已完全集成到我们的软件Imspector中。

• 感兴趣区域（ROI）序列成像

  下面是一个例子，其中abperior 仪器的活细胞功能模块包用于连续记录五个预定义的感兴趣区（roi）。一个强大的连续100帧，在进入下一个感兴趣区之前，每隔50秒记录一个区域。因此，每个ROI在显微镜下记录约1.5小时，总采集时间约为7.5小时。在此期间，我们的easy3D-STED显微镜完全自动完成。

  如果没有活细胞功能模块包，这是不可能的：脉冲激光和自适应照明功能模块RESCue减少漂白，自动对焦工作以保持对焦稳定，我们使用水物镜并将样品加热到37°C，长时程自动控制实现该任务。

  
  
  在用SiR微管蛋白染色的活样本中选择5个感兴趣的区域。
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DyMIN STED

光毒性动态化降至最低的活细胞STED（DyMIN-STED）

智能光照度管理

DyMIN-STED的主要优点：
活细胞超分辨率显微镜的分辨率最好可达到25纳米*-DyMIN-STED大大减少了光照强度（光毒性和光漂白）对样品的影响（光照强度降低达两个数量级）。
分辨率真正降低到25纳米-通过分开的两个相距30纳米的荧光点结构证明。
体积/时间延迟成像与easy3D STED分辨率-DyMINSTED实质上减少了光漂白，并可长时间进行三维体量测量或按时间序列连续采集几十或上百帧
*仅取决于样品

 

补充了现有的智能STED照明方案：

 
 

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成像结果

DyMIN-STED非常清楚地解析了具有高信噪比的血影蛋白环形结构问题。原代海马神经元（离体22天）沿远端轴突呈特征性的~192纳米betaII血影蛋白。染料：abberior STAR 635P，激发波长635nm，STED波长775nm。样品来自Elisa D'Este（MPIbpc）。

Easy3D DyMIN-STED显著减少了漂白，因此能够获得各向同性分辨率约为85nm的体积图像。原代海马神经元（体外22天），白桦肽。染料：abperior STAR 635P，激发波长635nm，STED波长775nm。样品来自Elisa D'Este（MPIbpc）。比例尺200纳米。

Easy3D-DyMIN-STED能清楚地解析核膜（红色）内外侧的两个核孔复合亚单位（NPC，绿色）。目标：nup153（绿色），层粘连蛋白（红色）。染料：Alexa 594，Abperior STAR 635P，激发波长：561nm，635nm，STED:775nm。

用DyMIN-STED采集后可观察到明显较低的漂白。核孔复合蛋白（nup153），俄勒冈绿488标记，激发波长488nm，STED波长：595nm。

用easy3D DyMIN STED和常规STED显微镜记录了哺乳动物细胞核的三维图像。显示的是三维图像中的xz部分和采集后的共聚焦图像，突出了DyMIN-STED显著的漂白减少。请注意，DyMIN-STED使我们能够获得具有更高分辨率和信号的完整三维图像。图为Vero细胞，标记有抗核孔复合蛋白（nup153）的抗体。
 

RESCue STED

缩短激发态转换周期的活细胞STED（RESCueSTED）

智能光照度管理
 

 

RESCue避免不必要的激发和去激发循环，从而减少任何荧光标记的光漂白

减少激发和去激发循环对3D-STED体成像和延时STED成像特别有利

RESCue STED仅在有荧光标记（即目标结构）的位置应用激发和STED光。它在曝光无意义的位置（即没有发现标记）关闭激光

尽管光剂量比门控cw-STED成像降低了4%，比脉冲STED成像降低了20%，但图像的分辨率仍然保持不变

RESCue STED是一种高光子效率的超分辨率成像方法，而传统的STED在无论是否存在标记（即目标）时都对任何像素应用相同的光剂量，

共聚焦成像使用时也可利用RESCue的优势

RESCue的基本理念：

MINFIELD STED

智能光剂量管理

 

MINFIELD的主要优势：
真正分辨率低于20nm的超分辨率显微镜*-MINFIELD将视野限制在ted甜甜圈的最小内部（即成像场，如100x100nm）。多余的甜甜圈强度，连接到光漂白，是避开扫描场。更高的信号允许在更高的荧光对比度下分辨率提高到20纳米以下。
*取决于使用的荧光标记

775STED模块
使STED显纳镜的分辨率成像远红色光谱中的荧光染料。

775nm脉冲STED激光器，具有两个超分辨率STED通道

分辨率高达20纳米；一般情况下分辨率<30纳米

两个脉冲激光激发光源@561nm和@640nm，其他按要求提供

595sted模块
能够让STED显纳镜的分辨率成像绿色光谱中的染料或荧光蛋白。

 

595nm脉冲STED激光，具有两个超分辨率STED通道

分辨率高达25纳米；一般情况下分辨率<40纳米

488nm和518nm两个脉冲激光激发光源，其他按要求提供

easy3D STED

空间光调制器（SLM）技术 在xy和z之间可调的分辨率 单STED光束 允许使用不同的物镜 分辨率通常为75×75×75 nm 专为最大稳定性而设计 光学像差的校正

Abberior 仪器的 easy3D STED 模块使用可编程空间光调制器（SLM）来产生2D和3D-STED显微镜耗损光（STED光）所需的相位图纹。同时，它也可以用来校正光学像差。

Easy3D STED能够获取组织深处的3D-STED的体成像

自适应光学easy3D 3d-STED可对透明化后的成人肾脏样本进行深度成像

常规3D-STED成像和easy3D STED成像对肾小体深部XZ切片的比较。easy3D允许使用油镜对透明化处理后的大鼠肾组织进行深达80μm的成像。在没有自适应光学的情况下，浸油和样品之间的不匹配会导致信号完全丢失。

标签：Nephrin（红色，缩写为635P）和Podocin（绿色，AlexaFluor594）。样品由瑞典斯德哥尔摩KTH公司D.UnnersjóJess和H.G.Blom制备提供。

 

大鼠成年肾标本双色easy3D-STED体成像的表面渲染

图示为肾小体的一个简单的3d STED体成像的重建，显示在Podocin狭缝（绿色，AlexaFluor594）之间的Nephrin（红色，缩写为STAR635P）结构。

样品由瑞典斯德哥尔摩KTH公司D.UnnersjóJess和H.G.Blom制备提供

主要优势：

• 调整xy和z的分辨率以适应您的成像问题
• 使用2D或3D STED相位板的任意组合或任何用户定义的相位调制
• 像差校正：样品内部仍可使STED的PSF保持均匀的形状（>20μm）
• 快速在物镜之间切换：油浸、水浸、硅油浸...
• 易3d分辨率：最小90×90×90 nm，典型75×75×75 nm
• 2D分辨率:30×30nm以上
• 任何Abberior仪器的Infinity Linee STED都可以升级到easy3D　STED模块。