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上海益启生物科技有限公司
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20G
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文献和实验方法就能检出营养缺陷型。一般讲,一种高效率的诱变剂,只要有一种有效的筛选方法是可以获得任何突变型的。 诱变处理所用的细胞一般为对数期细胞。化学诱变剂的剂量一般以药物浓度表示。一定的剂量有一定的杀菌率和诱变率,通过杀菌率和诱变率可帮助我们了解一定剂量的诱变作用。诱变作用往往与药物处理时间和温度有关。具有较强诱变作用,较弱杀菌作用的诱变剂(如烷化剂)可采用较低剂量(约50%的杀菌率),反之,紫外线一般采用较高杀菌作用的剂量(如90%—99.9%杀菌率)。 二、实验材料 1.啤酒酵母菌单倍
研发和申报阶段必须开展的遗传毒性试验。 Ames试验是利用鼠伤寒沙门氏菌或大肠杆菌营养缺陷型菌株与被检测化合物共培养,如果化合物有一定的致突变性,则可使缺陷型菌株发生回复突变,重新突变为野生型。野生型菌株自身能合成组氨酸/色氨酸,能在无组氨酸/色氨酸的培养基上生长并形成菌落,营养缺陷型菌株自身不能合成组氨酸/色氨酸,不能在无组氨酸/色氨酸的培养基上形成菌落,据此可评价受试物的致突变性。 2 Ames试验菌株 Ames试验是以营养缺陷型的突变体菌株为指示生物检测基因突变的体外试验,常用的菌株
%的密度(24-72小时)。3、诱导间充质干细胞将其中一份培养的细胞用MSC成骨分化培养基诱导,另一份培养的细胞用 MSC生长培养基培养作为阴性对照。4、间充质干细胞的分化培养诱导培养14天,每3天更换一次培养基。操作时候小心不要破坏细胞的单层。 要点:在整个染色过程中不要让细胞在干的状态下放置超过30秒!三、向成软骨分化的操作流程 1、接种间充质干细胞 在96 U型底板中用MSC生长培养基接种间充质干细胞,每接种1x105个MSC。 2、MSC芽体形成 在24-48小时
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