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上海益启生物科技有限公司
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25 G
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文献和实验Preparation of cell lysates from E. coli by enzymatic lysis
(phenylmethylsulfonyl fluoride)in isopropanol 1M MgCl2Procedure1.Resuspend the cells in chilled lysis buffer in a ratio of 1 g cell wet weight to 1 ml lysis buffer.Add the PMSF (10 µl PMSF (100 mM)per ml of celsuspension)at this point.2.Add lysosyme to a final
是去垢的作用; PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,也称Phenylmethylsulfonyl fluoride或α-Toluenesulfonyl fluoride。中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19。可抑制丝氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin),也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶。有效浓度为0.1-1mM。难溶于水,且在水溶液中非常不稳
(TEB: PBS containing 0.5% Triton X 100 (v/v), 2 mM phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), 0.02% (w/v) NaN3 ) at a cell density of 107 cells per ml. 3. Lyse cells on ice for 10 minutes with gentle stirring. 4. Centrifuge at 6,500 x g for 10
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