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- FY-00164O192
- 2025年10月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海富雨
- 检测范围：
/
- 检测方法：
酶联免疫吸附试验法
- 应用：
检测
- 适应物种：
植物
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
操作注意事项
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data
期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
完善，其开发出的快速筛选表达试剂盒(包括质粒pPICZ和pPICZa及其它必需材料)、多拷贝表达试剂盒(包括质粒pPIC3．5k，pPIC9k及 pAO815及其它必需材料)以及经典表达试剂盒(包括质粒pPIC9，pPIC3.5，pHIL-D2及 pHIL．S1及其它必需材料)大大方便了科研工作者的实验工作。而对后期发酵过程和培养基配方等尚有待于进一步开展开创性的探索研究，突破传统培养发酵模式，优化培养基配方，为提高外源蛋白的表达量作出有益的探索。 3、缺陷及对策 尽管甲醇营养型酵母表达系统被认为
1 )和转录终止子(3′AOX1 )构建成整合型表达载体。PAOX1 是一个极强的启动子，醇氧化酶的产量最高可占甲醇酵母中可溶性蛋白质的30%［2］ ，所以能使外源蛋白质在它的控制下高效产生。其次，在载体中加入酿酒酵母的分泌信号和前导肽序列(α因子)构建分泌型载体，一方面可以减轻宿主细胞的代谢负荷，另一方面可以减少宿主细胞蛋白水解酶对外源蛋白质的降解，pPIC9K、pMETαA、B、C均为此类载体。此外，使多拷贝目的基因整合入甲醇酵母染色体，形成多个表达单元，产生高产的菌株，此类载体有pAO815
1、放射免疫吸附剂试验（radioimmunobsorbent test，RIST）：吸附有抗IgE的固相载体上加入含IgE的标本进行反应，形成抗IgE-IgE复合物。清洗后加入放射性同位素125I标记的抗IgE（125I-抗IgE），使形成抗IgE-IgE-125I-抗IgE复合物。再次充分清洗载体，以除去游离的125I-抗IgE，然后用γ计数器检测复合物的放射量。放射量与待测标本中tIgE的量呈正比。 2、ELISA：其原理相似RIST法，只是用酶来代替放射性同位素，最后
